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研究背景结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是我国常见的消化道肿瘤。近年来,CRC的发病率逐年增高,发病年龄也越来越年轻化。肝脏是晚期CRC常见转移部位,以奥沙利铂为基础的全身化疗是目前CRC肝转移主要化疗方案。然而,大多数患者在化疗过程中不可避免地发生耐药,攻克肿瘤耐药是目前晚期CRC治疗中急需解决的难题。同源异形盒基因(homeobox genes,HOX基因)是生物体内一类重要的调控胚胎发育、细胞生长分化的基因家族。近年来研究发现HOXA9基因与肿瘤的发生发展密切相关。有研究证实HOXA9在原发性结肠癌和结肠癌肝转移灶中异常表达,在分化程度越差、TNM分期越晚、淋巴结转移越早的结肠癌中,HOXA9表达水平越高。另外,有研究发现化疗药物会影响HOXA9基因表达,而HOXA9基因的表达水平又与肿瘤治疗效果有关。然而,奥沙利铂耐药能否改变CRC肝转移灶的HOXA9蛋白水平及HOXA9蛋白水平能否作为化疗疗效预测指标,尚未见报道。研究目的了解结肠癌亲本细胞(HT29)与结肠癌奥沙利铂耐药细胞(HT29/OXA)之间生物学特性和HOXA9基因表达是否存在差异,探讨HOXA9与奥沙利铂耐药及患者的PFS的关系,明确化疗前肝内HOXA9蛋白水平能否作为结肠癌肝转移患者含奥沙利铂两药化疗联合贝伐珠单抗治疗效果的预测指标。研究方法本课题分为两部分,第一部分是基础部分,以HT29细胞和HT29/OXA细胞作为研究对象,通过流式细胞仪分析HT29细胞与HT29/OXA细胞的HOXA9基因表达水平,光学显微镜下观察HT29与HT29/OXA的细胞形态、生长特点以及体外克隆形成情况。第二部分是临床研究,以晚期不可手术右半结肠癌肝转移(KRAS野生型)患者作为研究对象,进行前瞻性单中心小样本临床研究。一线给予FOLFOX或CapeOx化疗联合贝伐单抗治疗,免疫组织化学法检测化疗前和进展后肝转移灶组织标本中的HOXA9蛋白水平。结果1.HT29和HT29/OXA细胞形态、生长特点、克隆形成存在差异。与HT29细胞相比,HT29/OXA细胞体积较大、形态不均一,细胞生长速度较慢,群体倍增时间较长(29.26 h VS 22.53h)、细胞克隆形成率高((39.32±2.21)%VS(26.59±2.42)%)、HOXA9 基因表达率高((41.44±1.12)%VS(31.61±1.42)%)。2.化疗前结肠癌肝转移病灶中的HOXA9蛋白水平在不同性别、年龄、组织学分级、淋巴结转移状态患者中无统计学差异(P>0.05)。3.经FOLFOX或CapeOx化疗联合贝伐单抗治疗后进展患者的肝内HOXA9蛋白高表达率较化疗前增高(77.27%VS 45.45%)(P<0.05),肝内进展患者的肝转移灶HOXA9高表达率较化疗前增高(93.75%VS 50%)(P<0.05),而经奥沙利铂方案治疗后出现肝外进展的患者,其肝转移灶HOXA9高表达率较化疗前无明显变化(33.33%VS 33.33%)(P>0.05)。4.化疗前肝转移灶HOXA9蛋白水平与结肠癌肝转移患者经FOLFOX或CapeOx化疗联合贝伐单抗治疗后的PFS无关(P>0.05)。结论HOXA9与结肠癌奥沙利铂耐药有关,奥沙利铂耐药可能会促进进展靶病灶HOXA9蛋白表达。化疗前单一的肝转移灶HOXA9蛋白水平不能预测结肠癌肝转移患者经FOLFOX或CapeOx化疗联合贝伐单抗的治疗疗效。