鹅绒藤总生物碱体外抗肿瘤活性的研究

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目的:研究鹅绒藤总生物碱(Cynanchum Chinense Total Alkaloid,CCTA)对体外培养的肿瘤细胞株的增殖抑制作用及其作用机制的初步探索。方法:以人宫颈癌细胞Hela、人结肠癌细胞SW480、人前列腺癌细胞PC3为研究对象,以小鼠成纤维细胞3T3作为正常对照,用不同浓度的鹅绒藤总生物碱提取物(CCTA)分别对上述细胞作用24h、48h、72h、96h后,在普通光学显微镜下观察细胞形态的变化,用MTT法检测其生长抑制率,选取对CCTA敏感的细胞株,用流式细胞仪检测不同浓度下的CCTA对其细胞周期及凋亡率的影响。结果:①经过CCTA处理,Hela细胞和SW480细胞在光学显微镜下可见细胞形态发生明显变化,细胞密度减小,伸展性减弱、细胞边缘发亮,贴壁性减弱,胞质内可见发泡现象;而3T3细胞和PC3细胞则变化不明显;②与正常对照组相比,CCTA对Hela细胞及SW480细胞的抑制作用较为明显,而对PC3和3T3细胞则无明显抑制作用;且随着CCTA浓度的增加以及作用时间的延长,对Hela和SW480细胞的抑制作用逐渐增强,呈现出明显的时间剂量依赖性;尤其对于SW480细胞,当CCTA浓度达到2g·L-1作用96小时后细胞几乎全部死亡;③随着CCTA的浓度及作用时间的增加,Hela细胞位于S期的细胞明显增多,而SW480细胞位于G0/G1期的细胞明显增多;流式细胞仪检测到随着CCTA作用时间和剂量的增加, Hela细胞及SW480细胞的凋亡率均有增高,当CCTA浓度为1.5g·L-1作用48小时和72小时时,Hela细胞凋亡率分别为14.8%和15.36%;SW480细胞的凋亡率分别为34.33%和41.46%。结论:1、在本实验条件下,CCTA对小鼠正常成纤维细胞3T3无细胞毒作用;2、 CCTA对人宫颈癌细胞Hela及人结肠癌细胞SW480表现出明显的抑制作用,且呈时间和剂量依赖性;而对人前列腺癌细胞PC3则抑制不明显;3、 CCTA通过调控细胞周期和诱导细胞凋亡来实现对Hela细胞及SW480细胞的抑制作用。
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