食管癌是世界第九大恶性肿瘤，在全球死因中排名第六。我国是食管癌的高发国家，也是食管癌死亡率最高的国家，全世界每年约有30万人死于食管癌，其中一半是中国人。 对食管癌的治疗而言，一直以来都主张以手术治疗为主综合治疗措施。但到目前为止，多数学者的研究结果证实：远处转移已成为左右中晚期食管癌预后的主要因素之一，所以，食管癌远处转移预防和治疗的问题更为突出和迫切。对于预防和治疗肿瘤全身转移，化疗是目前唯一确切有效的方法。但目前缺乏一种行之有效的化疗药物和方案。 分子靶向治疗是随着对肿瘤生物学研究的深入而产生的。随着人们对肿瘤的认识从大体到细胞水平，再从细胞水平到分子水平，产生了一类新的分子靶向药物。其与传统的细胞毒性药物不同，它们在分子、生物化学和基因水平上选择性作用于肿瘤细胞，特异性阻断肿瘤细胞膜上的特异性受体，逐段细胞内异常的传导途径而对正常细胞功能仅有轻微影响。从而达到高效低毒治疗肿瘤的目的。 STI-571是由瑞士科学使用计算机设计的Bcr-ABL的酪氨酸激酶的抑制剂，能竞争性地抑制ATP和Bcr-ABL的酪氨酸激酶活性结构域的结合，从而抑制Bcr-ABL的酪氨酸激酶活性和阻止相关信号传导系统的激活。所以，STI-571最先被用来治疗慢性粒细胞性白血病。后来人们随着对STI-571研究的深入，发现STI-571不仅是Bcr-ABL的酪氨酸激酶的竞争性抑制剂，也是c-kit，PDGFR-β的酪氨酸激酶的竞争性抑制剂，并成功用于c-kit表达阳性的胃肠胶质瘤的治疗。 Yoshida等报道在食管癌组织中PDGFR具有很高表达，表达率为74.1％。所以，从理论上讲，STI-571可以抑制PDGFR-β的酪氨酸激酶活性，从而抑制PDGFR-β介导的细胞内传导通路，抑制细胞的增生和分化，并诱导其凋亡，抑制食管癌的增值和分化，达到治疗食管癌的目的。 研究目的：1.检测与STI-571相关的酪氨酸激酶类受体在食管癌大体标本中的表达情况。 2.检测食管癌细胞株CE-48T，CE-81T的PDGFR-α和PDGFR-β的表达情况，探讨STI-571应用于食管癌细胞株的可能性。 3.检测STI-571对食管癌细胞株CE-48T，CE-81T的细胞毒作用，测出其IC50值。探讨STI-571是否对食管癌细胞株CE-48T，CE-81T具有体外杀伤作用。 4.检测STI-571诱导的细胞凋亡情况，初步探讨STI-571诱导食管癌细胞株CE-48T，CE-81T凋亡的作用机制。 材料与方法：1.使用免疫组化法检测与STI-571相关的酪氨酸激酶类受体在食管癌大体标本中的表达情况。 2.使用Westernblot分析检测两种细胞株CE-48T，CE-81T的PDGFR-α和PDGFR-β的表达。为进一步进行体外细胞毒试验奠定基础。 3.应用MTT法测出STI-571对两种细胞的IC50值。 4.以AnnexinV/PI染色和Hochest33258染色检测STI-571以不同的时间(6、12和24hr)，不同的药物浓度(5μmmol/L、10μmmol/L和20μmmol/L，20μmmol/L、40μmmol/L和80μmmol/L)作用于食管癌细胞株CE-48T，CE-81T所诱导的细胞凋亡情况。 5.使用Westernblot分析检测细胞株CE-48T的p-PDGFR-β的表达，探讨STI-571诱导食管癌细胞株CE-48T，CE-81T凋亡的机制。 结果：1.食管癌组织中PDGFR-β的强表达率较高且明显高于癌旁组织和正常组织。 2.Westernblot结果显示：食管癌细胞株CE-48T表达PDGFR-β而不表达PDGFR-α；而食管癌细胞株CE-81T既不表达PDGFR-β，也不表达PDGFR-α。 3.STI-571作用于PDGFR-β表达阳性的食管癌细胞株CE-48T，其抑瘤率达到50％时，其药物浓度(IC50)是8.32±1.50μmmol/L；而对于PDGFR-β表达阴性的食管癌细胞株CE-81T而言，其抑瘤率达到大约80％时，其药物浓度大约为100μmmol/L；其抑瘤率达到50％时，其IC50是41.02±7.64μmmol/L，二者相比差异具有统计学意义(P=0.002)。 4.AnnexinV/PI染色检测表明STI-57浓度为10μmmol/L作用12小时时，STI-571诱导PDGFR-β表达阳性的食管癌细胞株CE-48T的细胞平均凋亡率为52.43±5.30％，与PDGFR-β表达阴性的食管癌细胞株CE-81T相比，差异具有统计学意义(P=0.001)；增加作用时间和药物浓度不能增加凋亡率；此时细胞经Hochest33258染色发现大量细胞凋亡的形态学改变，包括核固缩、核碎裂及凋亡小体的形成。而对于PDGFR-β表达阴性的食管癌细胞株CE-81T而言，经Hochest33258染色没有发现明显的细胞凋亡。 5.最后使用Westernblot分析检测细胞株CE-48T的p-PDGFR-β的表达表明，STI-571作用12小时时，p-PDGFR-β的形成明显受到抑制，而空白对照p-PDGFR-β的形成没有受到任何影响。 结论：1.食管癌组织中PDGFR-β的强表达率较高且明显高于癌旁组织和正常组织，提示STI-571有可能应用于食管癌的治疗。 2.PDGFR-β在可能食管癌的发生发展过程中起作用，也可能在食管的正常生长调控中起一定的作用。 3.食管癌细胞株CE-48T表达PDGFR-β，但不表达PDGFR-α；食管癌细胞株CE-81T既不表达PDGFR-α，也不表达PDGFR-β。提示食管癌细胞株CE-48T存在STI-571的作用靶点。 4.STI-571对表达PDGFR-β的食管癌细胞株CE-48T具有很强的体外杀伤作用，IC50是8.32±1.50μmmol/L。 5.STI-571可诱导PDGFR-β表达阳性的的食管癌细胞株CE-48T凋亡，抑制其增生。提示STI-571对于食管癌而言可能是高效低毒的治疗药物。 6.STI-571诱导PDGFR-β表达阳性的的食管癌细胞株CE-48T凋亡并抑制其增生的机制是抑制PDGFR-β的酪氨酸激酶的活性，抑制p-PDGFR-β的形成。 7.STI-571可同通过抑制食管癌细胞株CE-48T的PDGFR-β的酪氨酸激酶的活性，诱导其凋亡，为STI-571进行体内试验奠定了基础，也为STI-571用于治疗食管癌开创了广阔的前景。