背景:黑色素瘤是一种由黑色素细胞发展而来的恶性肿瘤。是导致大多数皮肤癌相关死亡的原因。转移性黑色素瘤是最高度变异、异质性和致死性的癌症类型之一。由于对黑色素瘤发病机制的了解有限,晚期黑色素瘤患者的治疗方案都局限于常规化疗药物,反应率低,总体疗效差。近几年,通过引入靶向疗法及检查点抑制剂免疫疗法,使得黑色素瘤患者的无进展生存期和总生存率显著提高。尽管在晚期黑色素瘤的临床治疗方面取得了实质性进展,但治疗无效、药物毒性、对当前治疗形式的原发和获得的抗性仍需继续研究,以寻找更有效、更持久的个性化治疗方案。随着研究进一步深入,已经有学者证实真核细胞中与4种r RNA共同构成核糖体的核糖体蛋白参与核糖体的组装并稳定r RNA结构,除了参与蛋白质生物合成外,还具有参与细胞增殖、分化、凋亡、DNA修复和其他细胞过程的核糖体外功能。其中RPL35a基因编码的110aa的蛋白能够结合5.8s以及启动和延长t RNA,该基因在m RNA水平的高表达与多种癌症有关。同时,我们结合黑色素瘤样本的组织芯片,疾病关键基因专利数据库和Cellomics高内涵功能筛选（HCS）平台,筛选与黑素瘤临床方面相关的功能阳性的基因。筛选后,我们发现核糖体蛋白RPL35a在黑素瘤中显著升高。因此,本项研究旨在探索目的基因RPL35a在恶性黑色素瘤细胞的增殖及凋亡过程中所起到的作用,并明确其在黑素瘤中的表达。方法:选取从2018年1月至2018年12月,因“皮肤色素性肿物”于大连医科大学附属第二医院皮肤科门诊就诊,后住院行手术切除且病理检查确诊为“恶性黑色素瘤”的患者,对恶性黑色素瘤患者的石蜡切片进行免疫组化染色,阐明人黑素瘤组织中目的基因的表达水平;此外,构建RPL35a敲低的慢病毒载体并使其感染到A375细胞中,通过q PCR检测敲低后该基因的m RNA水平,并进行细胞功能实验,对细胞计数,细胞周期,细胞凋亡,MTT等进行观察,从而探讨目的基因对细胞生物学功能的影响。结果:1.在临床标本的免疫组织化学染色中,RPL35a基因在黑素瘤患者癌组织中的表达远高于癌旁组织（P<0.01）。结果:2.用shRNA慢病毒感染3天后,shRPL35a组中目的基因的表达在m RNA水平受到明显抑制;同时经Western Blot技术检测后测得A375细胞中RPL35a基因的内源表达在蛋白质水平同样显著降低。3.经Celigo连续检测5天后,shRPL35a组中A375细胞的增殖率明显低于sh Ctrl组（P<0.01）;4.在shRNA慢病毒感染5天后,shRPL35a组中A375细胞S期的细胞占比降低,G1期的细胞占比增加（P<0.01）,G2/M期的细胞占比无明显变化（P>0.05）;5.与shCtrl组相比,经FACS检测的RPL35a基因敲低组中A375细胞的数量显著增加;6.MTT检测得出RPL35a基因敲减组A375细胞的增殖速率受到显著抑制。结论:RPL35a在黑色素瘤组织中呈高表达状态。同时,我们成功构建慢病毒载体并将其感染到A375细胞中,敲减RPL35a基因后可抑制黑色素瘤A375细胞增殖,促进其凋亡,且这种作用可能是通过调节细胞周期使细胞停滞在G1期实现的。