术后放疗对兔坐骨神经原位移植后神经再生影响的实验研究

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目的:研究兔自体神经移植后放射治疗对周围神经再生的影响。方法:成年新西兰大白兔70只,左侧坐骨神经中段切除2cm神经段,立即原位移植,随机分为实验对照组(n=14)和实验组(n=56)。实验组术后2周或4周于手术部位给予总剂量28Gy或36Gy分割放射治疗,进一步实验组又分为2w-28Gy、2w-36Gy、4w-28Gy和4w-36Gy 4个小组(n=14);实验对照组左侧坐骨神经术后不行放疗,其右侧未行任何处理作为正常对照组。各组兔术后分别存活2或4个月。通过一般观察、神经电生理检查、病理组织学检查、神经丝蛋白(NF)免疫组织化学染色和透射电镜等方法对移植神经功能和组织结构进行观察和分析。结果:一、一般观察:坐骨神经原位缝合术后兔出现跛行、展爪反射消失和不同程度的溃疡:术后2个月实验对照组和实验组兔跛行减轻,展爪反射恢复,溃疡好转或痊愈,但与正常对照组相比仍较差;4个月时各组兔步态基本恢复正常,溃疡基本痊愈。二、电生理检测:实验对照组术后2个月坐骨神经传导速度(CV)和动作电位波幅(AMP)较正常下降(P<0.05);术后4个月CV和AMP基本恢复到正常水平。实验各组术后2个月CV和AMP较正常明显下降(P<0.05),2w-28Gy、4w-28Gy和4w-36Gy组CV和AMP与实验对照组比较亦下降(P<0.05),其中2w-36Gy组CV和AMP为各组中最低;术后4个月时,2w-28Gy、4w-28Gy和4w-36Gy组CV和AMP基本恢复正常,与正常对照和实验对照比较均没有统计学差异(P>0.05),而2w-36Gy组CV和AMP虽有所恢复,但仍低于正常对照和实验对照(P<0.05)。三、病理组织学观察:HE染色显示实验对照组术后2个月移植段神经纤维变性,部分髓鞘空泡变,伴炎性细胞浸润和雪旺细胞大量增生;术后4个月神经结构基本恢复,偶见髓鞘空泡状。实验组术后2个月各组炎性细胞浸润和神经纤维变性更严重,大量髓鞘空泡变,雪旺细胞增生弱,其中2w-36Gy组神经组织结构破坏最严重;术后4个月,实验各组神经结构明显恢复,可见大量再生神经纤维,但仍可见少数空泡变性髓鞘,其中4w-28Gy组移植段神经组织结构恢复最好。四、NF免疫组化染色:实验对照组和实验各组术后2个月,远段移植神经内NF免疫阳性产物较正常明显减少(P<0.05),实验各组NF免疫阳性反应均弱于实验对照组(P<0.05),其中2w-36Gy组NF免疫阳性反应最弱;4个月时,实验对照组和实验各组远段移植神经内均可见大量NF阳性产物,实验对照组和4w-28Gy组与正常对照比较没有统计学差异(P>0.05),2w-28Gy组、4w-36Gy组和2w-36Gy组NF免疫阳性反应仍弱于正常对照(P<0.05),且2w-36Gy组NF免疫阳性反应仍弱于实验对照组(P<0.05)。五、电镜观察:实验对照组术后2个月移植神经局灶出血坏死,雪旺细胞肥大增生,可见再生神经纤维和新生血管。术后4个月可见大量再生神经纤维,轴突粗,有髓纤维髓鞘厚且板层清晰,毛细血管丰富。实验各组术后2个月移植神经不同程度变性坏死,其中2w-36Gy组变性坏死最严重,未见神经纤维,而4w-28Gy组最轻,且可见薄髓再生神经纤维。4个月后实验各组均可见数目不等的再生神经纤维和血管,其中4w-28Gy组再生神经纤维数目多、轴突粗,髓鞘厚但有皱缩内陷,而2w-36Gy组再生神经纤维数目最少,轴突直径小,髓鞘薄且卷曲内陷。结论:1.周围神经原位移植后给予放疗,术后2个月时神经形态和功能均受到明显影响,但随着时间的延长,至术后4个月时,神经形态和功能基本恢复正常。2.周围神经原位移植术后给予放疗对神经形态和功能影响程度与放疗剂量有关,治疗剂量(36Gy)对神经形态和功能的影响较大,预防剂量(28Gy)影响相对较小。3.周围神经原位移植术后给予放疗对神经形态和功能影响程度与放疗开始时间有关,术后2周开始放疗对神经形态和功能的影响相对较大,而术后4周开始放疗的影响相对较小。
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