利用GmARR10基因创制大豆新种质

来源 :贵州大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:radicafrank
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
大豆是全球最主要的农作物之一,抗逆品种的应用是其优质高产的基本保障。本研究通过对细胞分裂素信号转导具有正向调节作用的大豆细胞分裂素反应调节因子GmARR10基因克隆,及其对模式植物拟南芥和天隆1号大豆遗传转化的研究,创制出GmARR10基因大豆基因新种质,初步揭示大豆细胞分裂素反应调节因子GmARR10的功能。并对细胞分裂素信号转导具有反向调节作用的GmAP1.2基因在大豆中的功能进行了研究,探讨了其与GmARR10的差别,为大豆抗逆和开花基因的发掘应用以及大豆分子育种提供了理论依据。本研究得到以下结果:1.根据大豆品种Willimas 82的基因组序列和拟南芥细胞分裂素反应调节因子(ARR10)基因序列设计引物,从大豆天隆1号中克隆获得ARR10-A、GmARR10-B和GmARR10-C 3个大豆ARR10同源基因;CDS序列长度分别为2034 bp、2097 bp和2040 bp,与参考基因的相似性均为100%,GmARR10s基因在豆科植物具有高保守性;3个GmARR10s基因的编码蛋白C端均含有一保守,并与细胞分裂素相关的信号功能域和Myb型DNA结合域,前者的信号接收域中存在一个天冬氨酸磷酸化位点。2.根据克隆的GmARR10s基因设计引物,通过实时荧光定量PCR(qPCR)对干旱、盐胁迫处理的大豆根系中的GmARR10-A,GmARR10-B和GmARR10-C基因进行差异表达检测结果表明处理组的目的基因显著上调,对大豆逆境胁迫起正向调节作用。3.构建了GmARR10-C植物表达载体Fu39-2-35S::GmARR10-C,进行模式植物拟南芥遗传转化和抗逆大豆种质创新研究。通过蘸花遗传转化法,获得拟南芥Col-0的转GmARR10-C基因植株5株,转基因拟南芥与野生型的表型无明显差异,但其主根较长,外施6-BA处理后主根缩短。转GmARR10-C基因拟南芥对细胞分裂素具有响应效应。干旱胁迫处理30 d表明,转GmARR10-C基因拟南芥的存活率为23.24%,明显低于野生型的(29.42%)。50mM NaCl胁迫处理8 d后,转基因拟南芥的存活率为27.98%,显著低于野生型(95.79%)。GmARR10-C基因对拟南芥的抗逆调节起负调节作用,与在大豆中的作用机制不同。并通过子叶节遗传转化方法获得3株大豆天隆1号转GmARR10-C基因植株。4.通过农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化法将GmAP1.2基因遗传转化大豆天隆1号,获得3株转植株。对转基因大豆的生长发育,花器官及叶片表型,以及叶绿素含量等进行研究,发现GmAP1.2过表达引起转基因大豆花期提前31 d左右,转基因植株在不同生长阶段表现出株高降低和叶片变小的现象,但花器官结构正常;叶绿素a,叶绿素b和总叶绿素含量分别增加1.43倍,1.52倍和1.57倍。GmAP1.2表达影响了大豆株高生长、叶片形状和叶绿素含量。
其他文献
酶是一种重要的生物催化剂,如何改善酶在应用过程中的活性和稳定性一直是酶工程领域研究的重点。近年来,聚合物偶联酶分子成为一种受到广泛关注的新技术手段,但迄今为止,研究人员对于聚合物分子链调控酶活性机制的科学认知仍然不够充分。脂肪酶是目前研究和应用最为广泛的酶分子之一。众多研究表明,脂肪酶的活性受到材料疏水性的影响。受此启发,本研究利用原子转移自由基聚合(Atom Transfer Radical P
荧光分子探针是一类将荧光团作为信号输出单元的、可用于检测多种物质、性能的发光型检测器件。分子荧光探针由于选择的荧光团特性不同而具有多种不同性质的发光性能,并且通
目的:研究睡眠低氧血症与晚期妊娠妇女的相互关系及影响因素。方法:随机选择天津市津南区咸水沽医院2017年1月-2017年6月妇产科住院部的晚期妊娠妇女(孕28周-孕40周)共162例,妊娠前查体无糖尿病及高血压,年龄21-43(27.0±3.25)岁,及同时期在我院体检中心进行健康体检的对照组158例非妊娠女性,年龄20-40(24.0±3.22)岁。所有参与实验者均在入选前测末梢血氧饱和度(静息
学位
随着全球电子信息行业的兴起,计算机应用使得建筑行业产生了革命性的飞跃。笔者一直以来从事建筑行业相关业务的软件开发,深知计算机软件编程在建筑中起着不可或缺的作用。众
熔体静电纺丝较溶液电纺以其效率高、无溶剂的挥发等优势成为目前的研究热点。大多数熔体静电纺丝制备的纤维都是以无纺布的形式收集,这极大地限制了其应用领域,若要把静电纺
社区是人们居住的重要场所也是人们生活的基本单元。随着我国城乡一体化进程的加快,越来越多的农村地区被卷入到城市化的潮流之中。“村改居”是推进城乡一体化的重要举措,得
随着互联网和计算机图形学的飞速发展,可以在浏览器端实现三维建模。现有的矿山可视化软件大多是对露天矿场开采进行建模和资源动态评价的,针对地浸砂岩类型矿场进行建模和资
随着全球对温室效应问题的重视,世界各国在二氧化碳排放上达成一致共识,共同致力于全球环境问题的改善。因此各国对涉及到二氧化碳排放相关的政策法规越来越严格,同时企业也
随着聚合物需求的多样性趋势,单个反应釜设备一般需要生产不同牌号的聚烯烃产品,因此聚合反应牌号切换操作需频繁进行,以建立柔性的生产模式。该切换过渡阶段不可避免地缩短