柳叶鼠李叶化学成分及其季节变化研究

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柳叶鼠李(Rhamnus erythroxylon Pall.)属于鼠李科(Rhamnaceae)鼠李属(Rhamnus)植物。其叶药食两用,用于清热除烦、消食化积、消化不良、腹泻、风火牙痛、小儿食积、热病津伤或温病后期诸症,也因其有浓香味,部分地区用以代茶。本论文对柳叶鼠李叶化学成分进行了分离和纯化,并通过质谱和核磁共振波谱技术进行了结构鉴定;同时建立了柳叶鼠李叶酚类物质的HPLC-DAD分析方法;研究了柳叶鼠李叶生长期酚类物质的季节变化,从而确定了其最佳采收时间。本论文研究为柳叶鼠李叶资源的开发和利用提供重要的科学依据。1.柳叶鼠李叶化学成分分离、纯化和结构鉴定利用溶剂萃取、硅胶柱层析以及半制备型HPLC等多种分离技术,对柳叶鼠李叶乙醇提取物进行分离和纯化,得到了9个单体成分,结合其理化性质与质谱和核磁共振波谱,鉴定了其中的7个单体成分:槲皮素(1)、山奈酚(2)、异鼠李素(3)、鼠李素(4)、鼠李柠檬素(5)、商陆素(6)、大黄素-3-O-α-L-鼠李糖苷(8);另外2个化合物(7和9)的结构正在鉴定中。以上化合物均为首次从柳叶鼠李中分离得到。2.建立了同时分离检测柳叶鼠李叶7种酚类物质的HPLC-DAD方法色谱条件:色谱柱:EC-C18反相柱(4μm,150 mm×4.6 mm I.D.);流动相:0.1%甲酸水溶液(A)和甲醇(B);梯度洗脱条件:0-20 min,40-55%B;20-20.1 min,55-59%B;20.1-35 min,59%B;35-42 min,59-100%B;42-48 min 100%B;48-50 min,100-40%B;检测波长:大黄素-3-O-α-L-鼠李糖苷为225 nm,槲皮素、山奈酚、异鼠李素、鼠李素、鼠李柠檬素和商陆素为370 nm;流速:0.8 m L/min;进样体积:20μL;柱温:25℃。在上述条件下,对柳叶鼠李叶中7种酚类物质进行了定性、定量分析。该检测方法灵敏度高、精密度良好,适用于柳叶鼠李叶酚类物质的检测分析,为柳叶鼠李的进一步研究提供科学基础。3.柳叶鼠李叶生长期酚类物质的变化研究(1)7种酚类物质的变化规律较为相似,其含量均在5月初较高,中旬降至较低水平,6月达到峰值后急剧下降,槲皮素、异鼠李素、鼠李素、商陆素和大黄素-3-O-α-L-鼠李糖苷的含量在9月有小幅度回升。这些变化可能与植物生长发育阶段、温度、光照等因素有关。(2)PCA分析表明,5月初和6月中旬柳叶鼠李叶酚类物质较为丰富。5月初叶片较嫩,适宜茶饮,但其生物量相对较少;6月中旬叶片较大,生物量更多,可获得更多的酚类物质。
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