生产上,繁殖母兔连续产仔6胎后,繁殖力急剧下降,常出现屡配不孕的现象,严重影响了其利用价值。已知氧化应激是引起雌性动物卵巢功能下降的主要因素之一。本研究分析了生产1-6胎（P1～P6）的母兔受胎情况,对比了 P1、P2和P6母兔的繁殖性能、卵巢组织结构、血清激素、抗氧化酶含量以及卵巢功能指标的变化,明晰了繁殖母兔不同胎次的卵巢功能状况。并通过转录组测序技术筛选出母兔卵巢功能的差异基因,验证SRD5A2对卵巢颗粒细胞的影响。另一方面,构建D-半乳糖（D-Galactose,D-gal）体外诱导母兔卵巢氧化应激模型,分析抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（N-Acetyl-L-cysteine,NAC）对其的缓解作用,为生产上研发延缓母兔因氧化应激导致卵巢功能衰退的技术提供理论依据。主要研究结果如下:1.P1～P6繁殖母兔的受胎率呈先升后降的趋势,其中P2最高,P6最低。以P2为对照,P1仔兔3周龄成活率和初生窝重极显著降低（P＜0.01）,初生均重显著下降（P＜0.05）,其余指标均无显著差异（P＞0.05）。P6母兔在窝产仔数、窝产活仔数、产活仔率、仔兔3周和5周龄均重显著低于P2（P＜0.05）,仔兔3周龄活仔率、初生均重极显著低于P2（P＜0.01）,与P2仔兔5周龄成活率无显著差异（P＞0.05）。P2母兔原始卵泡储备量显著少于P1母兔（P＜0.05）,P6母兔卵巢中原始卵泡储备量极显著低于P1、P2（P＜0.01）,初级卵泡、次级卵泡以及闭锁卵泡比例极显著高于其余两组（P＜0.01）。P2母兔血清中E2、P4、GSH、T-AOC以及卵巢中Klotho、TE的含量显著高于P1和P6（P＜0.05）,FSH、ROS、AMH和MDA的含量显著低于P6（P＜0.05）,且ROS、AMH和MDA在P2与P1母兔间无明显差异（P＞0.05）。结果表明,繁殖母兔在经过多次妊娠后,发生卵巢衰退的现象,具体表现为卵泡的损耗、免疫、抗氧化能力和卵巢功能指标的下降。2.P2和P6母兔的卵巢组织转录组测序结果显示,两组间存在213个上调和747 个下调基因,包括 CYP21A2、BRCA1、PTGFR、SGK1、PIK3R6、SRD5A2等与生殖功能相关的差异基因。GO注释到氧化还原、生殖细胞调控、胚胎发生和激素分泌等与卵巢发育相关的功能条目。KEGG主要富集到影响卵巢功能的PI3K-AKT信号通路、HIF-1α信号通路和cAMP信号通路等。利用qRT-PCR验证了差异基因的表达,结果与RNA-Seq预测的趋势一致,表明了转录测序的可靠性。本结果为揭示繁殖母兔多次妊娠导致卵巢衰退的分子机制提供了基础数据。3.兔SRD5A2基因CDS全长为765 bp,编码252个氨基酸。分离兔卵巢颗粒细胞并利用FSHR进行鉴定。通过过表达和干扰SRD5A2基因在兔颗粒细胞中的表达,发现过表达SRD5A2极显著下调了HIF1A和上调INHBB、HSD17B1、GDF9、BMP15的表达水平（P＜0.01）。而干扰SRD5A2的表达后,这些相关基因呈现出相反的结果。同时,SRD5A2的过表达显著促进颗粒细胞增殖,抑制细胞凋亡（P＜0.05）。而干扰后,显著抑制了颗粒细胞增殖,并促进了细胞凋亡（P＜0.05）。结果表明,SRD5A2基因通过调控颗粒细胞的增殖和凋亡,参与卵巢发育过程。4.采集兔卵巢组织进行体外培养,利用不同浓度的D-gal（5 mg/mL、10 mg/mL、15mg/mL）进行处理。发现D-gal处理的卵巢组织,随着浓度的增高,卵泡的结构遭到破坏,颗粒细胞的数量减少,SOD和GSH在卵巢内的含量极显著下降（P＜0.01）,ROS的含量极显著上升（P＜0.01）,其中10 mg/mL为模型构建的最适浓度。进一步加入不同浓度的NAC（0.1 mg/mL、0.3 mg/mL、0.5 mg/mL）对其进行缓解,发现0.1 mg/mL的NAC有效缓解了 D-gal造成的颗粒细胞凋亡现象。通过检测卵巢内抗氧化酶的含量和基因的表达,发现D-gal组（10 mg/mL）极显著降低了卵巢中GSH、T-SOD、CAT的含量（P＜0.01）,极显著下调了Nrf2、GPX、PRDX4、GSR、SOD1、TAF4B的表达水平（P＜0.01）。而在加入NAC（0.1mg/mL）后,抗氧化酶的含量和抗氧化基因的表达极显著高于D-gal组（P＜0.01）。结果表明,NAC可以通过缓解D-gal诱导的母兔卵巢氧化应激来延缓卵巢功能衰退。