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本论文旨在通过小白鼠试验给出红曲多糖的毒理特征和对提高机体免疫力的作用。并通过UV诱变红曲霉筛选红曲多糖的高产菌株,优化其液体发酵条件。研究了影响红曲多糖提取率和纯化程度的主要因素。通过一系列试验,初步给出了红曲多糖的理化性质、分子量、结构、以及组成成分等。 首先对红曲霉斜面培养基进行了研究,通过试验确定了麦芽汁糖化工艺,确定了斜面培养基:麦芽汁糖度6-8.5波美度,pH6-7,2%琼脂。 正常灌胃红曲多糖21天后,称量小鼠体重,并将肝、脾、肾、心、肺分别称重,计算脏体指数。结果可以看出,红曲多糖能增加肝脏质量,增加脾脏质量,而高浓度又降低脾质量,对其他各个器官无明显的不良影响。而且从SGPT含量来看,红曲多糖能显著降低其含量,而对血糖含量和SGOT含量影响不明显。结论是红曲多糖对小鼠无明显的毒害作用。 通过DTH试验,小鼠经灌胃红曲多糖后,其足跖肿胀度与对照组差异明显,说明红曲多糖能提高小鼠细胞免疫功能。在三氯甲烷致中毒试验中,和对照组相比,试验组SGPT含量有所降低说明红曲多糖有保肝护肝作用。碳粒廓清试验,给小鼠灌胃红曲多糖,能使廓清速率大幅增加表明红曲多糖可提高腹腔巨噬细胞吞噬能力,促使小鼠外周血E-玫瑰环形成,增加体内淋巴细胞转化率,使非特异性免疫加强。游泳试验和耐缺氧能力试验似乎说明红曲多糖在提高机体耐疲劳能力和缺氧条件下生活能力方面作用不大,有待进一步研究。 利用紫外线对出发菌株红曲霉AS 3.4701进行诱变处理,经过初筛确定了最佳诱变剂量:254 nm,2.0 min。再经过复筛获得了一株最佳突变株ZH-100,该突变株经连续三次传代,结果红曲粗多糖的产量分别是4.26g/L,4.69g/L,4.10g/L,平均4.35g/L。证明该菌株具有稳定的遗传性,比出发菌株提高产量286%。 通过三组试验,包括:(1)发酵条件优化的正交试验;(2)无机元素的含量确定的平行试验;(3)优化的发酵条件验证试验。得出结论:红曲霉在经过斜面培养后,以大米浆为基础培养物(固形物10%),加入NaNO3 0.15%,MgSO4·7H20 0.15%,KH2PO4 0.25%,温度35℃,220r/min摇床培养96小时,再经4000r/min离心5min,24小时醇沉,电热鼓风干燥等操作,产多糖量5.53g/L,高出初始条件27%。 通过正交试验优化得最佳提取条件为:浸提温度90℃;浸提料液比1:3;浸提时间30min。红曲多糖的产量为6.66 g/L,高出初始条件20%。 利用苯酚-硫酸法测得红曲粗多糖中总糖含量为78%;利用3.5-二硝基水杨酸法测定还