猕猴桃(Actinidia)隶属猕猴桃科(Actinidiaceae)猕猴桃属(Actinidia Lindl.)。对于猕猴桃属植物的遗传改良来说,不管是传统育种还是采用分子技术育种,丰富多样且易于获取的种质资源都十分重要。近些年来,超低温保存被认为是长期保存植物种质资源的理想方式。对猕猴桃属植物来说,目前仍缺乏简洁高效、适用性广的超低温保存方法,这极大的限制了猕猴桃属植物种质资源冷冻库的建立。同时,超低温保存体系的建立需要对再生植株进行田间表现评价以及对基因组和表观遗传稳定性进行评估,这些能够为建立植物种质资源的冷冻库提供有价值的可靠信息。本研究主要结果如下:1.以美味猕猴桃(A.chinensis var.deliciosa)‘郁香’为试材,通过对不同着生位置芽、带芽茎段不同培养天数、茎尖预培养、茎尖大小、PVS2处理时长和后培养基等影响超低温再生植株再生情况的关键因素进行筛选,建立了一种小滴玻璃化法对猕猴桃茎尖进行超低温保存的方法,并将这种方法成功运用在中华猕猴桃(A.chinensis var.chinensis)、美味猕猴桃等5个栽培品种上和大籽猕猴桃(A.macrosperma)、葛枣猕猴桃(A.polygama)以及对萼猕猴桃(A.valvata)三种砧木上。经超低温保存后,这5个种8个不同基因型猕猴桃的平均再生率为46.4%,其中再生率最高的是大籽猕猴桃(68.3%),再生率最低的是中华猕猴桃‘金猕’(22.5%)。2.在试管体系下,经过超低温保存的再生植株和未经超低温冷冻的对照之间在生根能力和营养生长方面都没有显著性差异。同样的,经过超低温保存的再生植株和未经超低温冷冻的试管苗对照转移到温室条件下培养,在存活率、营养生长等方面亦没有显著性差异。结果表明经过小滴玻璃化法超低温保存后的猕猴桃再生植株在生根能力和营养生长方面都保持了良好的稳定性。3.本研究使用内部简单序列重复性(Inter-simple sequence repeat,ISSR)和扩增片段长度多态性(Amplifed fragment length polymorphism,AFLP)两种分子标记方法对再生植株进行检测,不管是在试管体系下还是移栽到温室后,超低温保存再生植株与对照相比,都没有检测到任何特异性条带。这些结果表明,经过小滴玻璃化法超低温保存后的猕猴桃再生植株在基因组遗传特性方面表现出了良好的稳定性。4.通过甲基敏感扩增多态性(Methylation sensitive amplification polymorphism,MSAP)检测发现,经过超低温保存后再生的试管苗以及移栽到温室环境下的再生植株与对照相比,分别发生了12.8%和1.6%的DNA甲基化改变。本研究建立的小滴玻璃化法可以被认为是目前猕猴桃属植物最适合的超低温保存方法,这为建立猕猴桃属植物种质资源的冷冻库提供了理论依据和技术支持。