巨胞饮作用在泡沫细胞形成过程中的功能研究

来源 :中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ppl_fox
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在动脉硬化发展的过程中,单核细胞从外周血迁徙到动脉硬化区域,在动脉血管壁聚集,在此吞噬氧化型低密度脂蛋白等脂质变成泡沫细胞。除了清道夫受体介导的内吞导致巨噬细胞形成泡沫细胞外,非受体介导的内吞也开始受到关注。RAW264.7巨噬细胞具有自发的巨胞饮作用。磷脂酰肌醇3激酶和F-actin在其中起到关键作用。磷脂酰肌醇3激酶的抑制剂LY294002对于Transferrin受体介导的内吞和清道夫受体介导的Dio-Ac-LDL的内吞影响很小;对葡聚糖标记的巨胞饮作用的抑制作用很明显。在细胞培养过程中,含有40%体积的胎牛血清的培养基可以诱导RAW264.7巨噬细胞形成泡沫细胞。这个过程可以被LY294002抑制。通过抑制F-actin的组装从而抑制巨胞饮作用的药物—Cytochalasin B也能有效的抑制40%FBS培养基诱导的泡沫细胞的形成。进一步研究发现LY294002对氧化型低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞的形成也有明显的抑制作用。LY294002不影响酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶的表达;对清道夫受体A和CD36的表达也没有消极影响;对胆固醇的外排有轻微的促进作用;它对于40%FBS培养基诱导的小鼠腹腔原代巨噬细胞形成泡沫细胞的过程也能够有效地抑制;对于新鲜人血清诱导的RAW264.7巨噬细胞的泡沫细胞的形成也能够抑制。进一步研究发现脂质筏对巨胞饮作用很重要。巨胞饮作用发生在富含神经节苷脂的细胞膜区域。用β甲基环糊精去除胆固醇可以很明显地抑制巨胞饮作用,而对受体介导的Dio-Ac-LDL的摄取没有影响。综上所述,LY294002不影响受体介导的内吞,但是对巨胞饮作用有强烈的抑制作用,所以很可能是通过抑制巨胞饮作用从而抑制巨噬细胞对胆固醇的摄取来抑制泡沫细胞的形成。Cytochalasin B也印证了这一点。LY294002影响到氧化型低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞的形成,这说明了一部分修饰的脂蛋白也会通过巨胞饮作用被细胞摄取;其对小鼠腹腔原代巨噬细胞泡沫细胞的形成和人血清诱导的泡沫细胞的形成的抑制作用,则提示了在体内巨噬细胞形成泡沫细胞的过程中巨胞饮作用很可能也有相应的功能。
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