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研究背景自噬是细胞内一种高度保守的代谢过程，近年来研究发现其在肿瘤的发生、发展和治疗中扮演着重要的作用。尤其是在肿瘤的治疗过程中，多种治疗方法包括化疗、放疗均可导致肿瘤细胞自噬增强，但自噬究竟是肿瘤的治疗过程中发挥什么作用尚存在争议，需要针对具体治疗措施分别对待。索拉非尼是FDA批准的第一个治疗肝癌的分子靶向药物，已有研究表明索拉非尼能诱导肝癌细胞发生自噬，这可能是最终引起索拉非尼治疗抵抗的一个重要潜在因素。本课题在前期发现索拉非尼能剂量依赖性性地诱导肝癌HepG2细胞发生自噬的基础上，进一步探讨索拉非尼诱导肝癌细胞自噬的可能机制及自噬在索拉非尼治疗中的作用，以期为增强索拉非尼的临床治疗效果提供重要的实验依据与治疗思路。研究目的探讨索拉非尼诱导肝癌细胞自噬的可能机制及自噬在索拉非尼杀伤肝癌细胞中的作用分析。研究方法GFP-LC3质粒转染肝癌HepG2细胞后观察索拉非尼对细胞自噬小体形成的影响；免疫共沉淀法检测HepG2细胞中Beclin1和Mcl-1间的相互作用及索拉非尼处理后对Beclin1和Mcl-1相互作用的影响；使用siRNA技术沉默自噬相关基因Atg5或用自噬抑制剂药物氯喹(CQ)抑制自噬后检测对索拉非尼杀伤肝癌细胞效应的影响；Hoechst33258染色及台盼蓝染色检测各种处理对细胞凋亡与死亡的影响；Western Blot检测凋亡和自噬相关蛋白PARP、 Mcl-1、Atg5、Beclin1和LC3等分子的表达变化。研究结果（1）索拉非尼处理肝癌细胞后自噬标志蛋白LC3-Ⅱ表达量以剂量依赖性的增加，同时索拉非尼处理后转染GFP-LC3质粒的肝癌细胞中自噬小体形成显著增加。（2）Co-IP发现HepG2细胞中Mcl-1与Beclin1间存在蛋白相互作用，而索拉非尼处理后Mcl-1和Beclin1间的结合作用减弱。（3）Western Blot结果显示索拉非尼处理后肝癌细胞中Beclin1无明显变化，而Mcl-1蛋白表达量明显降低。（4）通过基因沉默或小分子抑制剂抑制自噬后能增强索拉非尼的杀伤肿瘤细胞的效应。结论索拉非尼能剂量依赖性的诱导肝癌HepG2细胞自噬。其可能的机制是通过下调Mcl-1蛋白表达水平，从而减弱了Mcl-1与Beclin1的相互作用，使游离的Beclin1增多，从而诱导细胞自噬。通过基因沉默或小分子抑制剂抑制自噬后能明显增强索拉非尼对肝癌HepG2细胞的杀伤效应。