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目的:观察ADORA1基因在二甲双胍联合放疗诱导结直肠癌SW480和HCT116细胞增殖凋亡作用,并探讨其可能的相关机制。方法:1、运用基因表达谱芯片技术分析人结直肠癌SW480和HCT116细胞在对照组、单用二甲双胍组、单用X射线组、二甲双胍联合X射线组中基因的表达差异,筛选出有明显差异且与凋亡相关的表达基因,为本研究的后续研究做好准备以及机制研究提供新的线索。2、应用平板克隆形成实验和流式细胞术检测单用二甲双胍、单用X射线、二甲双胍联合X射线、二甲双胍联合DPCPX(ADORA1抑制剂)等不同干预后人结直肠癌细胞的生存及凋亡情况。3、采用定量PCR验证基因芯片的分析结果,同时检测细胞在不同方式处理后,细胞中ADORA1、Caspase3、Caspase9、Bcl-2的m RNA表达情况。4、应用Western Blotting检测不同方式处理细胞后相关蛋白的表达情况。结果:1、平板克隆形成实验结果显示:单用二甲双胍(1mmol/l)能抑制细胞的生存能力,而二甲双胍(1mmol/l)与DPCPX的联合组对细胞生存能力的抑制作用明显低于单用组,二甲双胍联合DPCPX组对细胞的克隆形成抑制明显低于单用二甲双胍时,且差异有统计学意义(P<0.05)。2、流式细胞术检测结果显示:细胞在单用二甲双胍组或二甲双胍联合X射线组中加入DPCPX后,诱导细胞的凋亡率均明显下降,且有统计学差异(P<0.05)。3、定量PCR结果显示:验证了基因芯片的结果,在二甲双胍(1mmol/l)与X射线(8Gy)联合组ADORA1、Caspase3、Caspase9的m RNA表达均高于单用组,而Bcl-2的m RNA表达低于单用组,且有统计学差异(P<0.05)。4、Western blotting结果显示:与单用二甲双胍组(1mmol/l)、单用X射线组(8Gy)比较,联合组的p-AMPK、ADORA1、Caspase3、Caspase9表达明显增加,而p-m TOR和Bcl-2的表达明显下降。结论:1、二甲双胍可抑制人结直肠癌SW480和HCT116细胞增殖及生存能力,但二甲双胍联合DPCPX组对细胞生存能力的抑制作用明显低于单用二甲双胍组。2、二甲双胍与X射线联合促进人结直肠癌SW480和HCT116细胞凋亡的效果要明显强于二者单用时引起的细胞凋亡,但单用二甲双胍组或二甲双胍联合X射线组中加入DPCPX后,诱导细胞的凋亡率均明显下降。3、从研究中我们发现ADORA1与二甲双胍具有诱导人结直肠癌细胞凋亡作用。