九种重要蚊虫鉴定芯片的开发与初步应用

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蚊虫(Mosquitoes)属昆虫纲(Insecta)双翅目(Diptera)长角亚目(Nematocera)蚊科(Culicidae),其危害不仅在于骚扰吸血,部分种类还是疟疾(Malaria)、登革热(Denguefever)、黄热病(Yellowfever)、流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis B)、寨卡病毒感染症(Zika virus infection)、丝虫病(Filariasis)等多种虫媒传染病的传播媒介,严重危害人类健康。然而,不同蚊种所传播疾病的媒介效能相差极大,因此,对蚊虫种类的准确快速鉴定是预防控制蚊媒传染病的重要前提。传统的形态学鉴定主要是依据成虫的外部形态特征来区分,在形态特征不完整以及一些近缘种或姐妹种的分类鉴定上存在一定的困难。当今,分子生物学技术已广泛应用于物种的鉴定,然而这些方法大都集中在复合组或少数几种近缘种的鉴定,且大多基于PCR反应的方法无法一次性检测大量标本,难以满足疫情防控的要求。本试验选用九种常见重要媒介蚊虫,包括埃及伊蚊(Aedes aegypti),白纹伊蚊(Ae.albopictus),骚扰阿蚊(Armigeres subalbatus),致倦库蚊(Culex quinquefasicatus),骚扰库蚊(Cx.molestus),三带喙库蚊((Cx.tritaeniorhynchus),环带库蚊(Cx.annulus),中华按蚊(Anopheles sinensis)和微小按蚊(An.minimus),以两个线粒体基因(细胞色素氧化酶亚基I,COI以及NADH脱氢酶2,ND2)和一个核糖体第二内转录间隔区(ITS2)的序列为基础设计种专一性探针,开发可准确快速鉴定九种重要蚊虫的DNA芯片,并将此芯片应用于不同发育阶段的蚊虫及野外标本的测试,结果显示:此DNA芯片具有高灵敏度专一性,可快速准确地鉴定试验蚊虫,具有良好的应用前景。
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