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儿茶素是茶树的重要次生代谢产物，不仅是构成茶叶品质的主要化学成分，也是茶叶的主要药理功能成分。其中酯型儿茶素的保健功能要高于非酯型儿茶素。茶树中非酯型儿茶素的生物合成途径业已清晰，但酯型儿茶素的合成代谢途径及分子调控机理仍是研究难题。本课题前期工作发现，茶树酯型儿茶素合成途径包含两步反应，即没食子酸(gallic acid, GA)先在UDPG的没食子酰葡萄糖基转移酶(UDP-glucose:galloyl-1-O-β-D-glucosyltransferase，UGGT)作用下，形成1-O-没食子酰-β-D-葡萄糖(βG)。βG作为活化的没食子供体，在表儿茶素没食子酰基转移酶(epicatechin:1-O-galloyl-β-D-glucose O-galloyltransferase，ECGT)的作用下，将没食子基团转移到非酯型表儿茶素的C环-3-位点上，形成酯型儿茶素。同时酯型儿茶素也可以被茶树中酯型儿茶素水解酶(galloylated catechins hydrolase, GCH)水解成非酯型儿茶素和没食子酸。本文以茶树鲜叶为材料，研究GCH、UGGT和ECGT活性检测体系的影响因素（包括最适反应时间、最适温度、最适pH、最适底物浓度），建立较为简单的酶活性检测方法，为进一步分离纯化酶蛋白，打下良好的基础；并利用蛋白质分离纯化技术对GCH进行了初步纯化。旨在为深入探讨茶树儿茶素合成及其代谢的分子机制奠定基础。主要研究结果如下：1.利用高效液相色谱方法，对GCH、UGGT及ECGT酶的酶促反应产物进行了定性的检测。2.建立了GCH、UGGT及ECGT三种酶的最适检测体系。分别为：（1）G CH最适反应体系：2.5mL反应体系包括0.2mmol/L EGCG(ECG或GCG)，4mmol/L抗坏血酸，0.1mol/L磷酸缓冲液(pH6.5)，粗酶提取液若干(含0.4mg蛋白)，于30℃下反应30min。（2）UGGT最适反应体系：1.5mL反应体系包括1.4mmol/L GA，2.3mmol/L UDPG，4mmol/L抗坏血酸，1.5mmol/L水杨酸，0.1mol/L磷酸缓冲液(pH6.0)，粗酶提取液若干(含0.55mg蛋白)，于30℃下反应90min。（3）ECGT最适反应体系：1.5mL反应体系包括0.38mmol/L EGC或EC，0.8mmol/L1-O-没食子酰-β-D-葡萄糖（βG），4mmol/L抗坏血酸，1.5mmol/L水杨酸，0.1mol/L磷酸缓冲液(pH6.0)，粗酶提取液若干(含0.55mg蛋白)，于30℃下反应60min。3.利用硫酸铵分级沉淀、Q Sepharose FF离子交换层析和Superdex200凝胶层析对GCH进行了分离纯化，其比活力增加了1.71倍,回收率为9.9％。用SDS-PAGE检测纯化后酶的纯度，结果显示分离效果有待进一步提高。