蚕沙指纹图谱的建立及其生物碱提取物中乙醇残留量的测定

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蚕沙是蚕蛾科昆虫家蚕幼虫摄食桑叶后排出的粪便,是一种传统中药。伴随着新的分离分析技术的涌现和发展,蚕沙的研究与应用进入了一个全新的发展阶段。如何安全有效的运用蚕沙资源,变废为宝,成为天然产物研究工作者的一个研究热点。   本文以蚕沙为研究对象,对不同产地的蚕沙进行质量控制的研究。分别建立了蚕沙甲醇提取物的指纹图谱及蚕沙生物碱提取物的指纹图谱,为蚕沙及蚕沙制品的质量控制提供了依据。并对蚕沙生物碱提取物中的残留溶剂进行了测定。   采用柱前衍生的方法,采用高效液相色谱-荧光检测法测定建立了蚕沙生物碱提取物的指纹图谱,以1-脱氧野尻霉素(DNJ)为参照物,确定了蚕沙生物碱提取物的5个共有峰,采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”软件进行相似度评价,12批药材的相似度均大于0.9,表明不同产地的12批蚕沙的生物碱提取物具有较高的相似性。   为了进一步评价蚕沙的质量,采用高效液相色谱对蚕沙甲醇提取物进行指纹图谱分析,以甲醇-四氢呋喃·水(0.05%醋酸)为流动相,考察了波长260nm处的色谱图,以东莨菪素为参照物,确定了蚕沙提取物的11个共有峰,采用国家药典委员会推荐的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”软件进行相似度评价,12批药材的相似度大于0.75,说明12批蚕沙的内在质量有一定差别。   测定了蚕沙生物碱提取物残留乙醇含量。采用直接进样毛细管气相色谱法,色谱柱以100%二甲基聚硅氧烷为固定相的石英毛细管柱Rtx-1(30 m×0.25mm,0.25μm),以N,N-二甲基甲酰胺(DMF)为溶剂,氮气为载气,流速1.0 mL/min,采用氢离子火焰检测器(FID),检测器温度为350℃,进样口温度350℃,分流比30:1,进样量1μl,柱温采用程序升温:初始温度为30℃,保持5 min,以80℃/min升温至110℃,保持5 min再以60℃/min升温至320℃。被测物在0.004-0.072 mg/mL范围内呈良好线性关系,回收率为100.3%。本方法快速,准确可靠,可用于蚕沙生物碱提取物中乙醇残留量的测定。
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