论文部分内容阅读
目的：本实验采用腹腔注射麻醉并气管注入博来霉素建立大鼠肺间质纤维化模型,从形态组织及细胞学的角度观察并分析益气养阴方对博莱霉素致大鼠肺间质纤维化的影响,研究益气养阴方对肺间质纤维化的治疗作用,为其进一步的临床运用及民族药物新制剂的开发奠定基础,为临床治疗肺间质纤维化提供理论依据。方法：清洁级健康雄性SD大鼠60只,体重为240±10g,随机分为5组：正常组、模型组、中药组、激素组、中药+激素组。正常组气管内注入生理盐水,其余4组分别注入相应剂量博莱霉素建立肺间质纤维化大鼠模型。造模后第28天开始灌胃给药,每天一次。中药组、激素组、中药+激素组分别灌入约2ml相应浓度的药物溶液,正常组与模型组灌入2ml生理盐水,连续灌胃28天。各组动物于灌胃后第14天、28天分两批处死。处死后分离肺组织,肉眼观察肺组织外观形态；分别取左肺下叶同一部位行病理切片,作HE染色和Masson染色以观察形态学改变；同时取右肺底同一部位用4%多聚甲醛固定后,用原位杂交检测试剂盒检测肺组织中TNF-α、TGF-β1、IFN-γ的表达,观察益气养阴方对肺间质纤维化的治疗效果,并行统计学分析。结果：1一般状态观察：正常组饮食如常,好动活泼,反应敏捷,皮毛有光泽,体重逐渐增加,二便正常,第28天时无死亡现象；模型组食欲不振,精神萎靡,反应迟钝,蜷缩少动,多有皮毛倒竖现象,身体较其它组消瘦,且均有不同程度的咳嗽,二便减少,28天时死亡4只；中药组饮食可,反应灵敏,体重无明显减轻,二便正常,28天时无死亡现象；激素组及中药+激素组饮食、皮毛尚可,体重有所减轻,28天时各有2只死亡。给药第0d即造模后第28天,模型组、中药组、激素组及中药+激素组与正常组相比,体重明显降低,且有明显差异(P<0.05)；给药后第28d中药组与激素组体重增长高于模型组,且有统计学意义(P<0.05)。2肺指数观察：给药28d后激素组、中药组及中药+激素组肺指数相比于模型组均下降,且具有统计学意义(P<0.05)；模型组大鼠与正常组相比肺指数升高,且有统计学意义(P<0.05)。3肺组织中TNF-αmRNA、TGF-β1mRNA、IFN-γmRNA的表达3.1模型组与正常组相比,TNF-αmRNA阳性细胞率升高,且具有统计学意义（P<0.05）；激素组、中药组、中药+激素组与模型组相比,TNF-αmRNA阳性细胞率降低,且具有统计学意义（P<0.05）；中药组与激素组、中药+激素组相比,TNF-αmRNA阳性细胞率低,且具有统计学意义（P<0.05）。3.2正常组、激素组、中药组以及中药+激素组与模型组相比,TGF-β1mRNA阳性细胞率降低,且具有统计学意义（P<0.05）；中药组与激素组相比较,TGF-β1mRNA阳性细胞率略低,且具有统计学意义（P<0.05）；中药组与中药+激素组比较,无统计学意义（P>0.05）。3.3正常组、激素组、中药组、中药+激素组和模型组相比,IFN-γmRNA阳性细胞率升高,且具有统计学意义（P<0.05）；中药组与激素组、中药+激素组相比,IFN-γmRNA阳性细胞率略高,且具有统计学意义（P<0.05）。结论：1大鼠气管内注射博来霉素可建立肺间质纤维化大鼠模型,本实验肺组织病理学观察及肺组织中相关细胞因子检测验证了大鼠模型复制成功。2益气养阴组方作为附院防治IPF的经验方,临床已应用多年,本实验通过复制IPF大鼠模型,检测相关细胞因子,了解其防治IPF的作用机理,发现其可能通过降低肺组织中TNF-α、TGF-β1的含量和升高肺组织内IFN-γ的含量,最终达到延缓肺纤维化的作用。3中医药防治IPF已经展示出了良好的发展前景,有待于大家进一步研究。