【摘 要】
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目的:分析CMTM6在正常脑组织及胶质瘤组织中的表达及其与脑胶质瘤临床特征的关系,研究CMTM6对人脑胶质细胞瘤细胞增殖、侵袭迁移能力的影响及其分子机制。方法:1.通过GEPIA网站在线分析CMTM6在胶质瘤组织及正常脑组织的表达差异。2.通过分析CGGA数据库中胶质瘤数据,探究CMTM6表达与临床病理特征及预后关系。3.应用Western blot检测人脑正常胶质细胞株HEB、人脑胶质瘤细胞系U
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目的:分析CMTM6在正常脑组织及胶质瘤组织中的表达及其与脑胶质瘤临床特征的关系,研究CMTM6对人脑胶质细胞瘤细胞增殖、侵袭迁移能力的影响及其分子机制。方法:1.通过GEPIA网站在线分析CMTM6在胶质瘤组织及正常脑组织的表达差异。2.通过分析CGGA数据库中胶质瘤数据,探究CMTM6表达与临床病理特征及预后关系。3.应用Western blot检测人脑正常胶质细胞株HEB、人脑胶质瘤细胞系U251、U87、LN229、A172中CMTM6的表达4.应用脂质体递送si RNA和慢病毒介导sh RNA敲减U251和A172细胞中CMTM6基因的表达,应用Western blot及Q-PCR检测敲减效率。5.通过CCK-8实验及平板克隆试验检测sh-NC组和sh-CMTM6组细胞活性和增殖能力的变化。6.通过Transwell实验及划痕实验检测细胞侵袭迁移能力的变化。7.通过生物信息学分析获得人脑胶质瘤数据库中CMTM6表达相关基因,并应用GESA3.0软件进行功能富集和参与信号通路的分析。8.Western blot探究sh-NC和sh-CMTM6组JAK2/STAT3信号通路相关蛋白STAT3和p-STAT3表达水平的影响结果:1.GEPIA在线分析TCGA胶质瘤数据联合GTEx结果显示,胶质瘤中CMTM6基因表达量高于正常脑组织（P＜0.05）,对CGGA胶质瘤数据进一步分析显示,CMTM6 m RNA表达水平与胶质瘤WHO分级、IDH1基因突变状态、1p/19q联合缺失状态相关（P＜0.05）。2.下载TCGA及CGGA库中人脑胶质瘤CMTM6 m RNA表达和预后数据,K-M生存分析显示CMTM6基因表达高的患者总生存期缩短。3.敲减CMTM6分子抑制胶质细胞瘤增殖、迁移和侵袭能力。1)Western blot结果显示:与正常胶质细胞系相比,胶质细胞瘤系中CMTM6表达水平更高,其中U251、A172胶质瘤细胞系表达最为显著。2)转染si-CMTM6后使胶质瘤细胞系（U251、A172）m RNA水平和蛋白水平表达下降。慢病毒转染sh-CMTM6入胶质瘤细胞U251和A172后,免疫蛋白印迹法结果显示CMTM6表达明显被抑制。3)CCK-8及平板克隆结果显示,敲减CMTM6后,U251和A172的细胞增殖活性和克隆能力明显下降（P＜0.05）。4)敲减CMTM6后,胶质瘤细胞U251和A172的细胞迁移能力和侵袭能力较对照组明显下降（P＜0.05）。4.GSEA预测分析发现CMTM6参与细胞凋亡、细胞粘附等调控等过程。Western blot结果显示,敲减CMTM6后,胶质瘤细胞JAK2/STAT3信号通路被抑制。结论:CMTM6表达水平与胶质瘤恶性程度正相关,其高表达可作为胶质瘤患者预后不良因素;CMTM6蛋白的敲低抑制了STAT3蛋白的磷酸化,CMTM6可能参与调控JAK2/STAT3信号通路。
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