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研究以广东当家品种黑皮果蔗(Badila)为材料,以黑皮果蔗幼嫩心叶和茎尖分生组织为外植体。第一阶段,通过直接诱导黑皮果蔗幼嫩心叶愈伤组织分化成苗,从愈伤组织诱导、分化及丛生芽苗增殖等方面,探究黑皮果蔗组织培养过程中,适宜的培养基配方与激素配比。第二阶段,对黑皮蔗腋芽与组培苗进行不同条件热处理,比较果蔗腋芽与组培苗生长状况,茎尖存活状况、茎尖愈伤组织诱导与茎尖芽苗生长状况,比较不同热处理对黑皮果蔗腋芽与组培苗茎尖脱毒的影响。为黑皮果蔗品种的改良提供一些理论依据。研究结果如下:1黑皮果蔗组培苗诱导试验结果:(1)黑皮果蔗幼嫩心叶愈伤组织诱导试验中,以MS+2,4-D1.5~3.0mg/L范围浓度最佳,出愈率为87.5%,愈伤组织出愈率最高,呈淡黄色颗粒松散状,质量最好。黑皮果蔗愈伤组织增殖试验中,适宜的2,4-D与NAA组合可以有效促进愈伤组织生长,以MS+2,4-D2.0mg/+NAA0.01~0.05mg/L培养基最佳,愈伤组织呈白色或淡黄色,颗粒松散,质地均匀,增殖系数最高,达4.88。(2)果蔗愈伤组织分化试验中,6-BA与NAA激素组合诱导,愈伤组织分化率较单独添加6-BA时显著提高,丛生芽苗生长状况良好。当添加MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L激素配比时,黑皮果蔗愈伤组织的分化率最高,达95%,得到的丛生芽苗,长势好,直立,叶片浓绿,芽苗高壮,芽苗高度大于2cm。(3)黑皮果蔗丛生芽苗增殖试验中,向MS培养基中单独添加6-BA浓度为1.0~2.0mg/L时,黑皮果蔗丛生芽苗增殖系数最高,达4.95,丛生芽苗高壮,多分蘖,无玻璃化现象。2黑皮果蔗组培苗脱毒试验结果:(1)不同热处理条件处理黑皮果蔗腋芽试验中,黑皮果蔗腋芽在温度48℃水浴10min条件下,腋芽萌发率最高,为93.33%,萌发的腋芽粗壮,叶色浓绿,带有2~3片幼叶,芽苗平均高度≧10cm。(2)不同热处理条件对黑皮果蔗组培苗生长状况试验中,黑皮果蔗组培苗以温度30℃培养25d,存活率最高为95%,组培苗直立粗壮,长势良好。宜做茎尖分生组织剥取材料。(3)黑皮果蔗茎尖大小直接决定茎尖愈伤组织诱导的难易程度。不同茎尖大小在相同热处理条件下,以剥取1.0mm茎尖大小,愈伤组织出愈率最高,达83.33%。(4)黑皮果蔗组培苗茎尖愈伤组织诱导最佳培养基配方为:MS+2,4-D1.5mg/L,茎尖愈伤组织出愈率为96.67%。(5)黑皮果蔗组培苗茎尖成苗最佳培养基配方:6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,组合诱导茎尖直接成苗,可以得到叶色浓绿,粗壮,长势良好的单株芽,分化率为96.67%。(6)本研究所有热处理条件下,剥取大小0.3mm茎尖,诱导茎尖愈伤组织,茎分化培养培养得到的茎尖苗,经PCR技术检测,结果显示高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SRMV)与甘蔗花叶病毒(Sugaerane mosiac viurs,SCMV)两种病毒脱毒率达到100%。(7)黑皮果蔗茎尖丛生芽苗不定根诱导,最佳培养基配方为:MS+NAA2.0mg/l+IBA0.5mg/l+PP3330.5mg/l+0.1%AC,不定根诱导效果最佳,平均根数达到6.15根/株,根系粗壮,侧根多,茎尖丛生芽长势良好。