【摘 要】
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随着科技的发展和社会的进步,人类对于细胞的形成越发好奇,而人工细胞模型就是这种兴趣的产物。目前,通过自下而上的方法设计和构筑微尺度囊泡模型的方法引起了科学界的广泛
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随着科技的发展和社会的进步,人类对于细胞的形成越发好奇,而人工细胞模型就是这种兴趣的产物。目前,通过自下而上的方法设计和构筑微尺度囊泡模型的方法引起了科学界的广泛关注。主要的微尺度囊泡模型包括脂质体,聚合物囊泡,蛋白质囊泡等,而单一组分囊泡局限性阻碍了囊泡模型快速发展,为了弥补单一组分囊泡功能的不足,本课题以天然细胞膜的主要成分(蛋白质、磷脂、胆固醇)为基元,基于疏水相互作用构筑多元杂合微尺度囊泡,将多种成分的优点集于一体,并赋予其类似真实细胞的功能与性质。以牛血清白蛋白、胆固醇和氮异丙基丙烯酰胺为原料,通过酯化反应和RAFT合成了氨基化的牛血清白蛋白、胆固醇单体、羧基化胆固醇、聚氮异丙基丙烯酰胺和氮异丙基丙烯酰胺-胆固醇单体嵌段共聚物等物质,接着耦合制备两种两亲性耦合物,并对两亲性耦合物进行结构表征和定量分析;最后以两亲性耦合物为基元,经Pickering微乳液法制备蛋白质囊泡,再与磷脂二次组装,从而顺利构筑了大小均匀且性质稳定的杂合微囊泡,其拥有较好的生物相容性、膜流动性、热稳定性和热敏性等功能和优点。以其中一种多元杂合微尺度囊泡为研究对象,采用SEM观察囊泡的形貌特征,基于荧光漂白再恢复技术和一维扩散方程对其膜的流动性进行探讨,与红细胞膜(扩散常数为1×10-9 cm2/s)对比发现,构筑的杂合微囊泡膜流动大小与红细胞膜同为一个数量级,其扩散常数为4.8×10-9 cm2/s,因此赋予了杂合微囊泡膜类似天然细胞膜的结构特性;最后采用不同分子量的FITC-Dextran对微囊泡膜通透性进行分析,结果表明膜透性为30 KDa,从而实现了囊泡膜控制物质进出的功能特性。
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