【摘 要】
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金银羽自别雌雄为雏鸡性别鉴定的方法之一,该方法利用伴性交叉遗传原理、杂交后代根据绒羽颜色差异鉴别雏鸡性别。有报道指出鸡SLC45A2为金银羽位点的控制基因,但由于该基因的表达受很多修饰基因的影响,金银羽自别雌雄的方法目前只在来源于洛岛红-洛岛白遗传背景的褐壳蛋鸡配套系中广泛应用,而在其他遗传背景中极少应用。本研究先以京红和罗曼两个金银羽配套系父母代和商品代个体DNA为研究材料,利用PCR-RFLP
【基金项目】
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省地方鸡产业体系（4006-126062）； 自主科技创新基金（52902-0900201403）；
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金银羽自别雌雄为雏鸡性别鉴定的方法之一,该方法利用伴性交叉遗传原理、杂交后代根据绒羽颜色差异鉴别雏鸡性别。有报道指出鸡SLC45A2为金银羽位点的控制基因,但由于该基因的表达受很多修饰基因的影响,金银羽自别雌雄的方法目前只在来源于洛岛红-洛岛白遗传背景的褐壳蛋鸡配套系中广泛应用,而在其他遗传背景中极少应用。本研究先以京红和罗曼两个金银羽配套系父母代和商品代个体DNA为研究材料,利用PCR-RFLP的方法对SLC45A2基因上的一个与银羽有关的错义突变（Leu347Met）进行分型,结果发现京红鸡分子鉴定基因型与表型的符合率为100%,罗曼鸡的符合率为99.7%,成功建立了鸡金银羽位点基因型的分子鉴定方法。以欣华鸡及郧阳白羽乌鸡个体DNA为材料对该方法进行了验证,结果发现欣华鸡个体全为金色羽基因型,分子鉴定基因型与实际表型符合;郧阳白羽乌鸡个体大部分携带金色羽基因、少部分携带银羽基因,但因隐性白羽基因的上位效应,无论携带金色羽基因还是携带银色羽基因的个体羽色均为白色。采用上述分子鉴定方法对景阳鸡不同羽色（粟麻、黄麻）个体进行检测,发现所有的黄麻羽个体均为金色羽基因型;绝大部分（49/57）粟麻羽个体为银色羽基因型,部分（8/57）分子鉴定为金色羽基因型的个体（纯合子公鸡1只和半合子母鸡7只）表型为粟麻羽（或与粟麻羽难于区分）,我们猜测景阳鸡的粟麻羽可能由金银羽位点的银色羽基因控制、黄麻羽个体可能由金色羽基因控制,但金色羽基因的表达可能受到其他修饰基因的干扰。为了验证上述判断并研究在景阳鸡中利用金银羽进行自别雌雄的可行性,我们进行了粟麻羽与黄麻羽个体的正反杂交试验,并对后代的性别比和羽色比进行卡方检验。结果发现1-5号家系的性别比和羽色比均未显著偏离理论值;9、10号家系的羽色比没有显著偏离理论值;6-8号家系中,公鸡的羽色比没有显著偏离理论值,母鸡的羽色比显著偏离理论值。对6、7、8号家系分别进行卡方检验,6号家系的公鸡和母鸡的羽色比没有显著偏离理论值,7、8号家系公鸡的羽色比没有显著偏离理论值,母鸡的羽色比显著偏离理论值。从杂交试验和卡方检验结果看,粟麻-黄麻羽控制位点符合伴性遗传模式,证明粟麻羽表型确为金银羽位点银色羽基因控制。在能进行自别雌雄的黄麻羽公鸡与粟麻羽母鸡杂交后代（1-5号家系）中,利用金银羽自别雌雄的准确率为94.2%。不能利用金银羽自别雌雄的个体均为粟麻母鸡,但分子鉴定基因型均为金羽半合子。鉴于黄麻羽公鸡与粟麻羽母鸡后代自别雌雄的准确率不高,结合前述部分个体分子基因型与实际表型不符合的结果,我们认为在景阳鸡群体中可能存在干扰金银羽位点等位基因表达的修饰基因,为此选择深褐色位点（DB位点,由S0X10基因控制）和黑色素扩展位点（E位点,由MC1R基因控制）进行了研究。结果发现在DB位点上,所有景阳鸡和京红个体均为野生型纯合子,表明DB（SOX10基因）位点基因对金银羽基因的表达没有影响。在景阳鸡群体中对MC1R基因（E位点）研究找到2个同义突变和6个错义突变;以杂交试验中的黄麻公鸡和粟麻母鸡亲本为材料,对剩余6个错义突变进行PCR-RFLP分型,发现212T＞A,274G＞A和644A＞C完全连锁、636G＞A和637T＞C完全连锁。根据274 G＞A酶切结果统计景阳鸡1-5号亲本和京红商品代及父母代个体在E位点上的基因型,发现京红的父本（ZsZs）均为e+e+基因型,母本（ZSW）有Ee+和e+e+两种基因型,商品代有Ee+和e+e+两种基因型,考虑到E位点基因对其他位点羽色基因的表达会有影响,因此将后代中可能出现EE基因型的家系剔除,剩余个体金银羽自别雌雄准确率为95.4%,较之前的94.2%有小幅度的提高,说明在景阳鸡背景下,E位点对S位点影响并不大。由于剔除后剩余个体数量太少,该结果还需要进一步验证。本研究建立了鸡金银羽基因分子鉴别方法,确认景阳鸡粟麻-黄麻羽为金银羽位点基因控制,杂交试验发现在景阳鸡中利用金银羽位点基因进行自别雌雄准确率达94.2%。
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