背景支气管哮喘(哮喘)是一种由多种细胞及细胞因子参与的气道慢性炎症性疾病。有研究表明长链非编码RNA(lncRNA)可通过表观遗传调控、蛋白降解、RNA剪切等多种机制参与机体生理病理过程,在多种肿瘤、免疫系统疾病等的发生发展中发挥重要作用,在哮喘气道平滑肌细胞的增殖凋亡、激素抵抗、免疫平衡等方面发挥作用,但在气道上皮细胞杯状化生中的研究鲜有报道。方法本实验主要通过FISH探针、q PCR检测哮喘患者支气管肺泡灌洗液(BALF)及小鼠肺组织NR2F2-AS1表达水平变化。且在细胞水平过表达NR2F2-AS1,检测杯状化生标志基因MUC5AC变化。动物水平对哮喘模型小鼠通过AAV病毒气道滴入过表达鼠源NR2F2-AS1,通过PAS染色、肺功能等方法检测该基因在体水平调控作用。同时,利用探针对NR2F2-AS1进行细胞定位,进一步通过双荧光素酶实验、q PCR、western blot等方法探索其可能的调控机制。结果(1)lncRNA参与哮喘杯状化生调控:测序分析发现与异物对照组相比,哮喘患者BALF中lncRNA表达谱存在差异。同时,杯状化生重要诱导因子IL-13可调控部分lncRNA表达。而于人支气管上皮细胞过表达NR2F2-AS1可缓解MUC5AC表达。(2)NR2F2-AS1在哮喘小鼠中表达下降:对哮喘模型小鼠肺组织分别进行原位杂交及定量分析发现,与BALF测序结果一致,哮喘组中NR2F2-AS1表达下降。(3)在体水平过表达NR2F2-AS1可缓解杯状化生:对哮喘模型小鼠过表达NR2F2-AS1炎症水平检测未见明显变化,但可缓解气道上皮内糖原累积状况,对小鼠肺功能具有一定治疗作用。(4)NR2F2-AS1调控杯状化生机制探索:排除NR2F2-AS1通过与mi RNA相互作用及顺式调控NR2F2方式调控MUC5AC表达,但是对FOXA2存在正向调控作用,参与Hippo及Wnt信号通路的调控。结论:lncRNA参与哮喘中气道上皮细胞杯状化生的调控,NR2F2-AS1对杯状化生调控起抑制作用。动物水平过表达NR2F2-AS1可缓解气道上皮中糖原累积状况,对肺功能存在一定改善作用。