研究目的及背景：再生障碍性贫血(aplastic anemia，AA，简称再障)是由多种因素引起的骨髓造血功能衰竭，是严重危害儿童身体健康的常见血液病。其发病机制十分复杂，可能与造血干细胞缺陷、微环境损伤和免疫异常等有关。但其确切病理生理机制至今不清。近年来随着免疫学、细胞生物学及分子生物学的迅速发展，人们对造血环境因素的调控有了更深刻的认识，一些学者研究发现骨髓造血受一些因子及其受体的调控，这些因子与其受体相互结合，通过不同的信号转导通路启动或关闭一系列的基因而实现对造血细胞增殖、分化和凋亡的调控。在生理条件下，这些因子使血细胞的增殖、分化、凋亡处于动态平衡。这些因子中最受瞩目的是干细胞因子(stem cell factor，SCF)及其相应受体(c-kit)。干细胞因子及其受体为作用于最早期多能造血干细胞的因子。可能与儿童再障发病机制有关，但目前国内外尚未见这方面报道。鉴于此，河南省杰出人才创新基金资助立项了“造血干细胞受体基因与再生障碍性贫血发病机制的研究”课题，本硕士课题即为这一课题的第二部分，第一部分已用ELISA方法测定了再障患儿血清中可溶性SCF及可溶性c-kit受体的水平，发现再障患儿中这两者水平均较正常儿童低。本实验应用免疫细胞化学和核酸分子原位杂交技术，检测再生障碍性贫血患儿与正常儿童造血干细胞因子及其受体蛋白和mRNA的表达水平，从分子表达水平方面探讨SCF及其受体在儿童再生障碍性贫血发病机制中的作用。通过再生障碍性郑州大学2(X)4年硕士研究生毕业论文干细胞因子及其受体基因在儿童再生障碍性贫血发病机制中的作用研究贫血患儿与正常儿童骨髓中造血干细胞因子及其受体蛋白和mRNA的表达水平的对比研究，进一步探讨造血干细胞因子及其受体蛋白和mRNA的表达水平与再障患儿造血干细胞分化、增殖和临床分型的关系，密切结合临床需要，将为揭示儿童再生障碍性贫血发病机制和指导临床诊治提供有价值的实验证据。 材料与方法:收集21例SAA，38例CAA的骨髓，记录其临床资料。同时收集51例经严格诊断为非血液系统疾病的患儿骨髓作对照。年龄范围3~14岁。提取单个核细胞，涂片，固定，应用免疫细胞化学和核酸分子原位杂交技术，测定再生障碍性贫血患儿与正常对照者造血干细胞因子及其受体蛋白和mRNA的表达水平。统计分析用了检验，以“二0.05作为显著性水准。 结果:①再障患儿组c一kit蛋白阳性表达率为23.72%，正常对照组c一kit蛋白阳性表达率为23.52%，再障患儿组与正常对照组相比，无显著性差异(P>0.05)。 ②再障患儿组c一kitmRNA阳性表达率为30.50%，正常对照组c一kitmRNA阳性表达率为29.41%，再障患儿组与正常对照组相比，无显著性差异(P>0.05)。 ③未发现再障患儿c一kit蛋白的表达与患儿的年龄、性别、发病年龄、临床分型等临床因素有关(尸均>0.05)。 ④再障患儿组SCF蛋白阳性表达率为22.03%，正常对照组SCF蛋白阳性表达率为41.17%，再障患儿组SCF蛋白阳性表达率显著低于正常对照组SCF蛋白阳性表达率，并且有统计学意义俨<。.05)。 ⑤再障患儿组SCF mRNA阳性表达率为23.72%，正常对照组SCF mRNA阳性表达率为43.13%，再障患儿组SCF蛋白阳性表达率显著低于正常对照组SCF蛋白阳性表达率，并且具有统计学意义伊<0.05)。 ⑥再障患儿SCF蛋白的阳性表达与患儿的年龄、性别、发病年龄等临床因素之间无关(尸均>0.05)。但SCF蛋白的阳性表达与临床分型有关，SAA组SCF蛋白的阳性表达明显低于CAA组SCF蛋白的阳性表达，并且具有统计学意义(P<0.05)。 结论:①再生障碍性贫血患儿造血干细胞因子蛋白和mRNA的表达水平较正常对照者都显著性降低，说明儿童再生障碍性贫血存在SCF异常，并且是发生在转录水平的异常。 ②再生障碍性贫血患儿c一kit蛋白和mRNA的表达水平与正常对照者相比，无显著性差异，提示c一kit受体与儿童再生障碍性贫血发病可能无关，但其结构及功能有待进一 2郑州大学2(X)4年硕士研究生毕业论文干细胞因子及其受体基因在儿童再生障碍性贫血发病机制中的作用研究步研究。 ③SCF在儿童再生障碍性贫血治疗中具有良好的临床应用前景。