噬血细胞综合征患儿外周血单核细胞Toll样受体2、3、4表达水平的研究

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目的:本研究通过分析噬血细胞综合征患儿外周血单核细胞Toll样受体2、3、4和下游信号传导分子、效应分子的表达改变,旨在进一步研究噬血细胞综合征发病机制,为其诊断、治疗提供理论依据。方法:采用流式细胞术对18例初发噬血细胞综合征患儿及18例正常同龄健康儿童的外周血单核细胞TLR2、3、4蛋白表达水平进行检测,同时采用实时荧光定量PCR方法对TLR传导通路中My D88、TRAF6、IRAK4、TRAM、TRIF、TBK1、IRF3等信号分子m RNA表达进行检测,比较两组间差异;并运用ELISA方法比较两组间血浆中IL-1β,IFN-α,INF-β,TFN-α表达水平的差异。结果:1)HLH组外周血单核细胞TLR2、3、4表达比例均明显高于健康对照组(P均<0.05)。2)TLR信号传导通路中各信号分子m RNA检测结果:HLH组My D88、TRAF6、IRAK4、TRAM、TRIF、TBK1、IRF3较健康对照组升高。其中My D88、TRAF6、IRAK4三者m RNA表达较健康对照组升高,P均<0.05,差异有统计学意义;TRIF、TBK1、IRF3的m RNA较正常对照组略有升高,但无统计学差异(P>0.05);HLH组TRAM分子m RNA表达水平低于健康对照组,P<0.05,具有统计学差异。3)HLH组血浆细胞因子IL-1β,IFN-γ及TNF-α水平较健康对照组明显升高(P<0.05),IFNF-α水平在HLH组虽较正常对照组有所增高但其差异无统计学意义(其P>0.05)。结论:1)TLR2、3、4的大量表达,提示TLR2、3、4在HLH的发病过程中起重要作用。2)HLH的发生过程可能由于内源性/外源性配体诱导TLR2/4-My D88依赖性通路信号传导及效应分子IRAK4等大量活化,以及同时存在而在TRIF依赖性通路中TRAM,TRIF等分子的失活或表达受到抑制所致。3)HLH之所以存在“炎症因子风暴”可能正是因为My D88依赖信号通路的活化,炎性细胞因子高表达,同时TRIF信号通路异常,导致I型干扰素释放受到影响,清除病毒能力下降;因子分泌失衡,使得病毒持续刺激,使体内炎性因子(IL-1,TNF-α,IFN-γ)大量堆积导致。
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