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研究目的1、建立子宫内膜异位症子宫内膜基质细胞(ESC)、脐带静脉血管内皮细胞(HUVEC)体外共培养模型。2、应用该模型,观察内异症患者(研究组em)及非内异症患者(对照组con)。ESC与HUVEC共培养后,细胞运动、迁移的微观行为,比较细胞共培养后行为的差异。3、用建立的模型探讨p雌二醇(E)、孕酮(P0)、血管内皮生长因子(VEGF)对.ESC与HUVEC共培养后HUVEC细胞运动的影响。方法1、取组织分离培养原代ESC和HUVEC2、设计制备二甲基硅氧烷(PDMS)章3、利用双孔道同时接种同一种细胞,进行愈合实验分别观察ESC、 HUVEC生长速度的差异。4、em及con组的ESC和HUVEC共培养并免疫荧光标记,24小时拍照,比较两组共培养体系中HUVEC生长差异。5、用含有不同浓度E、 PO、 VEGF的培养基培养共培养体系,并免疫荧光标记,24小时拍照,比较两组共培养体系中HUVEC生长差异。结果1、当孔道宽400μm时,孔道间距800um, ESC密度5X106/1、 HUVEC密度5×106/1时在孔道内生长良好,2小时可贴壁牢固,揭膜后图案化好。2、模型设计当愈合孔道宽度2001μm时,19小时HUVEC完全愈合；ESC未完全愈合(em及con无明显差异)；3、ESC与HUVEC共培养后,HUVEC条带靠近ESC一侧细胞密度高。4. ESC-HUVEC共培养体系中,较HUVEC单独培养,]HUVEC生长速度快(P<0.05); ESCem-HUVEC共培养体系中,较ESCcon-HUVEC共培养体系,HUVEC生长速度快(P<0.05)。5、 ESC-HUVEC共培养体系中,1)p雌二醇浓度为2.Onmol/l,HUVEC生长加快(P<0.05)；添加雌激素各组间,浓度与HUVEC生长成正相关(P<0.05)；2)孕酮浓度为30nmol/1,70nmol/1,HUVEC生长减慢(P<0.05)；添加孕激素各组间,浓度与HUVEC生长成负相关(P<0.05)；3) VEGF750pg/ml,HUVEC生长加快(P<0.05)；添加VEGF各组间,浓度与HUVEC生长成正相关(P<0.05)；4)p雌二醇浓度为0.2nmol/1,有抑制HUVEC生长现象(P<0.05)。结论：1、成功建立了子宫内膜异位症体外血管生成的细胞共培养模型,模型较为稳定,可操作性强；2、通过共培养模型的研究,子宫内膜基质细胞对脐带静脉血管内皮细胞的生长有诱导作用；研究组的诱导作用强于对照组；3、共培养体系中,高浓度p雌二醇、血管内皮生长因子促进脐带静脉血管内皮细胞生长、高浓度孕酮浓度为抑制脐带静脉血管内皮细胞生长；低浓度p雌二醇抑制脐带静脉血管内皮细胞生长。