目的：凋亡是急性心梗中心肌细胞的损伤形式之一，可能导致梗死面积的扩大和继发性心室重塑。信号素3A(Sema3A)是信号素家族（Semaphorins）的重要成员之一，其功能复杂涉及神经排斥，细胞迁移，分化以及诱导凋亡等诸多方面。在这一实验中，我们检测了原代培养的心肌细胞中是否含有Sema3A，以及缺氧损伤后的心肌细胞Sema3A表达的改变，并通过慢病毒转染改变心肌细胞Sema3A表达，研究了其对原代培养的心肌细胞凋亡的影响。　　 方法：使用原代培养乳鼠心肌细胞,分别进行30min，2h，5h，12h，24h缺氧(1％ O2)处理，通过实时荧光定量 PCR（Real time PCR）和蛋白免疫印迹法(Western Blot)两种方式，检测不同时间缺氧损伤对细胞Sema3A的表达的影响。设计构建能够用于心肌细胞的过表达和抑制Sema3A表达的慢病毒，并通过实时荧光定量 PCR（Real time PCR）和蛋白免疫印迹法(Western Blot)对慢病毒效果进行检测。细胞分为对照组，空病毒组(只携带GFP)，过表达/抑制病毒组(既携带GFP,又携带目的基因)。过表达Sema3A病毒转染后，蛋白免疫印迹法检测Cleaved caspase-3表达，缺口末端标记法（Tunel）检测凋亡率。抑制Sema3A病毒转染后，经过两小时的缺氧处理，Western Blot检测Cleaved caspase-3表达，Tunel检测凋亡率。　　 结果：①原代培养的乳鼠心肌细胞中含有Sema3A。发现不论是Mrna还是蛋白水平，随着缺氧时间延长(0h/0.5h/2h/5h/12h/24h)，原代培养的乳鼠心肌细胞的Sema3A表达逐渐下降（Mrna: 1.0vs0.900±0.273 vs0.721±0.128 vs0.497±0.112 vs0.072±0.024 vs0.058±0.020, 0.5h/2h P＞0.05, 5h/12h/24h P＜0.05;蛋白：0.451±0.130 vs0.450±0.101 vs0.444±0.106 vs0.355±0.087 vs0.260±0.068 vs0.205±0.075，0.5h/2h/5h P＞0.05，12h/24h P＜0.05)。②构建的慢病毒能够从Mrna和蛋白水平有效改变原代培养的心肌细胞Sema3A的表达（Mrna水平：过表达病毒转染后，相对于对照组：空病毒组0.752±0.135，P＞0.05；过表达病毒组：33.670±3.840，P＜0.01；抑制病毒转染后，相对于对照组：空病毒组0.892±0.125，P＞0.05；抑制病毒组：0.179±0.052，P＜0.05），（蛋白水平：过表达病毒转染后：对照组0.484±0.060；空病毒组：0.589±0.072，P＞0.05（相对于对照组）；过表达病毒组：1.003±0.130，P＜0.05（相对于对照组）；抑制病毒转染后：对照组0.895±0.084；空病毒组：0.723±0.072，P＞0.05（相对于对照组）；抑制病毒组：0.373±0.032，P＜0.05（相对于对照组））。③通过增加细胞Sema3A表达，Cleaved caspase-3表达上调（对照组：0.542±0.102；空病毒组：0.650±0.098；过表达病毒组：1.674±0.246，P＜0.05），细胞凋亡率显著增加(对照组：0.672％±0.055％；空病毒组：0.854％±0.164％；过表达病毒组：23.458％±8.656％，P＜0.05）。抑制心肌细胞Sema3A的表达后进行缺氧2小时处理，Cleaved caspase-3表达下调（对照组：1.453±234；空病毒：1.567±0.431；Sema3A病毒：0.752±0.112，P＜0.05），细胞凋亡率下降(对照组：15.892％±1.342％；空病毒：17.620％±1.587％；Sema3A病毒：5.478％±0.958％，P＜0.05）。　　 结论：我们的结果提示原代培养的乳鼠心肌细胞能够表达Sema3A,在受到缺氧损伤后，心肌细胞中Sema3A表达逐渐下调。我们在试验中增加Sema3A表达，心肌细胞凋亡率增加，减少Sema3A表达，能够降低缺氧导致的凋亡损伤。我们的结果提示心肌细胞缺氧损伤后，可能通过下调Sema3A表达减少凋亡。