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本文拟将具有神经再生治疗作用的NSCs移植与具有血管发生作用的VEGF基因治疗相结合,采用VEGF修饰的NSCs移植治疗脑梗死模型的策略,探讨两者的关系以及治疗效应,为临床应用提供理论基础和可行的操作方法。为观察VEGF165基因体外转染神经干细胞和转VEGF基因神经干细胞移植治疗脑梗死的系统研究打下基础方法:以pUC19VEGF165为模板获得目的基因VEGF165片段;pAdTrackVEGF165与腺病毒骨架质粒pAdEasy细菌内同源重组构建重组腺病毒载体pAdCMVVEGF165;肾293细胞中包装及扩增重组腺病毒pAdCMVVEGF165;(4)重组腺病毒pAdCMVVEGF165鉴定及滴度测定。
本文通过腺病毒载体介导VEGF基因体外转染C17.2神经干细胞,观察和评价转染的效率,鉴定外源性VEGF基因在C17.2神经干细胞的表达,以及外源性VEGF基因对C17.2神经干细胞增殖、分化和在缺氧状态下凋亡的影响。
本文揭示了转染VEGF基因的C17.2神经干细胞移植可促进脑梗死后新生血管形成,改善神经功能,缩小梗死后体积;C17.2神经干细胞移植联合VEGF基因治疗效果优于单纯的C17.2神经干细胞移植或VEGF基因治疗。转染VEGF基因的C17.2神经干细胞移植是治疗脑梗死的有效方法。