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实验目的研究新型环磷酰胺类衍生物9b的体内外抗肿瘤活性，并初步探究其作用机制。实验方法1、体外采用MTT法观察9b对人肝癌细胞株HepG2、人乳腺癌细胞株MCF-7、人白血病细胞株K562、人卵巢癌细胞株SK-OV3和人骨肉瘤细胞株143B细胞的增殖抑制作用。2、流式细胞术（FCM）观察细胞的凋亡率和细胞周期的变化。3、体内建立小鼠肝癌细胞H22、小鼠肉瘤细胞S180和小鼠黑色素瘤细胞B16荷瘤小鼠模型，观察9b的体内抑瘤效果。4、采用RT-PCR法检测人肝癌细胞HepG2细胞周期相关蛋白cyclinD1和p21在mRNA水平的表达；并用Western blot法检测人肝癌HepG2细胞G1期相关蛋白cyclinD1和p21的表达情况。实验结果1、MTT结果显示，9b对体外培养的HepG2、MCF-7、K562、SK-OV3和143B细胞有抑制增殖作用，且呈剂量和时间依赖性，9b处理HepG2、MCF-7、K562、SK-OV3和143B细胞48h的IC50分别为32.34、87.07、149.10、71.27、98.50μmol·L-1。2、流式细胞仪结果显示，9b使HepG2、MCF-7、143B细胞G0/G1期细胞和K562、SK-OV3细胞G0/G1和G2/M期细胞明显增加，细胞凋亡率随药物浓度增加亦呈增长趋势。3、体内实验结果显示，9b（3、10和30mg·kg-1·d-1）对小鼠H22、S180和B16实体瘤的生长有一定的抑制作用。4、RT-PCR和Western blot检测结果表明，9b降低人肝癌HepG2细胞G1期相关蛋白cyclinD1在mRNA及蛋白水平的表达，并升高p21在mRNA及蛋白水平的表达。实验结论新型环磷酰胺类衍生物9b具有体内外抗肿瘤活性，其抗肿瘤机制可能与影响细胞周期分布和诱导细胞凋亡相关。人肝癌HepG2细胞G1期阻滞机制可能与细胞周期相关蛋白cyclinD1和p21在mRNA及蛋白水平的表达有关。