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生理条件下,血细胞的增殖、分化、成熟、释放和凋亡处于动态平衡,在此过程中,由正、负两大类调控因子所组成的网络参与对血细胞的调控,从而维持造血的稳定。急性白血病是造血系统恶性肿瘤,以造血细胞分化成熟受阻,未分化细胞大量增殖为其特征。我们前期的研究及其他人的研究报告均证实:与正常血细胞相比,白血病细胞存在着多种正性自分泌因子,并指出白血病细胞正、负自分泌因子失衡很可能是白血病重要发病机制之一。TGF-β1是目前已知最强的血细胞增殖抑制因子,已有研究表明白血病细胞本身产生的TGF-β1可通过自分泌或旁分泌方式抑制白血病细胞增殖。我们已经首先报道急性白血病病人血清中TGF-β1水平明显低于正常人,本研究进一步研究急性白血病原代细胞、白血病细胞株培养上清中TGF-β1水平以及外源性TGF-β1基因对高致瘤HL-60细胞株( hHL-60细胞,下同)的作用。本文的研究内容主要包括以下两个部分:1、用ELISA方法检测急性白血病原代细胞、白血病细胞株和正常人骨髓单个核细胞培养上清中TGF-β1的表达水平,进一步应用长链RT-PCR技术扩增白血病细胞和正常人骨髓单个核细胞TGF-β1启动子序列和编码序列以及TGF-βⅡ型受体的编码序列,并进行序列的测定。2、将含有猪全长TGF-β1cDNA的逆转录病毒载体PDOTGF-β1通过脂质<WP=4>体转染法导入hHL-60细胞,通过集落形成抑制实验、凋亡峰的检测以及观察DNA片段化的形成来探索外源性TGFβ-1基因对 hHL-60细胞的作用,进一步应用RT -PCR方法检测外源性TGF-β1基因对 hHL-60细胞bcl-2、hTERT表达的影响。本研究所取得的结果及结论:1、急性白血病原代细胞、白血病细胞株培养上清中TGF-β1水平低于正常人骨髓单个核细胞培养上清。2、急性白血病原代细胞TGF-β1的启动子序列、编码序列和正常人比较未发现异常,在两例病人中发现TGF-βⅡ型受体在相同的位置插入一段长75bp相同序列,经同源分析发现含有这一插入片段的序列属于TGF-βⅡ型受体亚型,既往文献报道仅在酵母菌中存在,而未在正常人基因序列中发现。3、外源性TGFβ-1基因具有抑制 hHL-60细胞生长的作用,而且这一作用可能是通过下调bcl-2、hTERT基因的表达起作用的结论:(1)急性白血病原代细胞、白血病细胞株存在TGF-β1分泌减少;(2)部分病人的白血病细胞存在TGF-βⅡ型受体表达的异常,有关该变异受体在白血病发病机制中的作用有待进一步研究;(3)外源性TGF-β1基因对hHL-60细胞的生长有抑制作用,可通过下调bcl-2、hTERT基因的表达促进肿瘤细胞的凋亡;(4)TGF-β1在急性白血病发病机制中起可能重要作用。