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目的观察针刺血清对哮喘大鼠气道平滑肌细胞p38 MAPK表达的影响,进而探讨针刺血清抗哮喘的作用机制。方法将30只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、哮喘模型组及哮喘模型针刺组,每组10只。采用卵蛋白雾化吸入法制作大鼠哮喘模型,通过“三穴五针”法对哮喘模型针刺组大鼠进行针刺干预。动物饲养结束后,对空白组和哮喘模型针刺组大鼠进行腹主动脉取血,离心后抽取上清、220nm过滤除菌,56℃灭活备用于气道平滑肌细胞干预。通过检测大鼠气道阻力和肺顺应性、肺泡灌洗液中炎性细胞计数以及肺组织HE染色判定大鼠哮喘模型的建立。采用不过筛酶消化法原代培养气道平滑肌细胞,通过传代纯化细胞,并通过形态学观察及免疫细胞化学法鉴定细胞。用针刺血清体外干预哮喘大鼠的气道平滑肌细胞,通过MTT比色法检测针刺血清体外干预的最适浓度。空白组与哮喘模型组的气道平滑肌细胞分别给予空白血清、针刺血清及阻断剂(SB203580)干预。通过免疫细胞化学法、Western blot法及RT-PCR法测定气道平滑肌细胞中p38MAPK的表达。结果1与空白组相比,哮喘模型组大鼠肺顺应性降低,肺弹性阻力增高;与哮喘模型组相比,哮喘模型针刺组大鼠的肺顺应性增高,肺弹性阻力降低。2与空白组相比,哮喘模型组的肺泡灌洗液中炎症细胞明显增多;与哮喘模型组相比,哮喘模型针刺组大鼠肺泡灌洗液中炎症细胞减少。3大鼠肺组织HE染色显示,哮喘模型组大鼠支气管壁有大量炎性浸润,管腔内黏液与红细胞增多,且气道壁增厚、变形;而针刺组大鼠肺组织管腔内黏液及红细胞显著减少,管壁的炎性细胞浸润性破坏亦显著减少。4采用改良后的组织贴块法可获得纯度较高、数量较大的气道平滑肌细胞。5针刺血清体外干预气道平滑肌细胞的最适浓度为20%。6经空白血清干预的哮喘大鼠气道平滑肌细胞的p-p38MAPK蛋白表达显著高于空白组细胞及经针刺血清、阻断剂干预的哮喘模型组细胞。7经空白血清干预的哮喘大鼠气道平滑肌细胞的p38MAPK基因表达高于空白组细胞及经针刺血清、阻断剂干预的哮喘模型组细胞。结论1卵蛋白雾化吸入法可导致大鼠出现呼吸功能障碍、气道炎症反应等哮喘症状发生,而针刺可改善其哮喘症状。2针刺血清用于哮喘大鼠气道平滑肌细胞体外干预的最佳浓度为20%。3针刺血清可抑制哮喘大鼠气道平滑肌细胞中p38MAPK蛋白的表达。