维生素A对肉牛肌内脂肪沉积及ACC/HSL、PPARγ基因表达的影响

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通过体内和体外3 个试验研究添加维生素A(VA)对杂交育肥肉牛肌内脂肪沉积及脂肪酸合成限速酶ACC、脂肪动员分解限速酶HSL、脂肪细胞分化关键调控因子PPARγ基因表达的影响。试验一:选用16 头体重约350kg 的健康利木赞×鲁西黄牛杂交一代育肥肉牛,随机分为4 个处理,每个处理4 个重复,分别饲喂添加不同浓度VA 的日粮。VA 添加水平分别为饲养标准的0%、50%、100%和200%(饲养标准为2200IU/kg 饲料干物质),以未添加VA 的处理作为对照组,每月称重,饲养6 个月后每组挑选3 头屠宰,取西冷、臀中肌,测定肌内脂肪含量。结果表明,VA 添加水平为50%的处理组体重增加明显高于对照组和其它处理组(P>0.05);VA 添加量最高组西冷肌脂肪含量明显低于对照组(P<0.05),并且肌内脂肪含量随着VA 添加量的增加有明显的下降趋势。试验二:提取各组肉牛西冷、臀中肌的总RNA,利用实时定量RT-PCR,检测ACC、HSL、PPARγmRNA 相对于对照组的表达水平。结果显示,VA 添加量最高组中西冷、臀中肌HSL 基因表达量明显低于对照组(P<0.05);添加VA 的3 个处理组西冷、臀中肌PPARγ基因表达量都明显低于对照组(P<0.05),并且随着VA 添加量的升高,ACC、HSL、PPARγ基因的相对表达量下降。试验三:体外培养试验肉牛的皮下脂肪细胞,在无血清培养液中添加3 种形式的VA——视黄酸RA、视黄醇RO、棕榈酸视黄酯RP。每种添加形式分为0、5、25、100μg/dL 4 个浓度梯度,未添加VA 的为对照组。前脂肪细胞分化10 天后收集细胞,提取总RNA,用实时定量RT-PCR 检测ACC、HSL、PPARγmRNA 的相对于对照组的表达水平。结果显示:添加不同VA 形式的脂肪细胞分化都明显受到抑制,脂肪细胞聚集脂滴数目明显减少;添加三种不同形式VA 浓度分别为25、100μg/dL的脂肪细胞ACC 基因表达量极显著低于对照组(P<0.01);添加RA、RO 浓度分别为25、100μg/dL的脂肪细胞HSL 基因表达量极显著低于对照组(P<0.01),但添加RP 的各处理组HSL 基因的表达没有明显变化(P>0.05);三种不同形式VA 的添加浓度为5、25、100μg/dL 时,脂肪细胞PPARγ的表达量都明显低于对照组(P<0.05),其中RA、RO 各处理组都极显著低于未添加VA 的对照组,并且RA对PPARγ基因表达的抑制作用更加明显;随着培养液VA 浓度的增加,ACC、HSL、PPARγmRNA 相对表达水平呈下降趋势。由试验可见,维生素A 能有效减少PPARγ基因的表达量,间接抑制PPARγ调控的脂肪代谢相关基因(ACC、HSL 等)的表达,最终抑制脂肪细胞的分化与成熟;也可能VA 具有直接抑制ACC、
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