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目的基于脑肠轴探讨蜘蛛香环烯醚萜类有效部位(TIV)抗抑郁作用和改善抑郁伴有轻度腹泻、内脏高敏等症状的作用及机制。方法1.蜘蛛香生药材,用70%乙醇浸提3次,减压浓缩得醇浸膏,大量水分散均匀后选用D101大孔树脂进行纯化,先用纯水和60%乙醇依次洗脱,再用95%乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩回收乙醇得浸膏,45℃真空干燥得TIV。以Chlorovaltrate为对照品,采用紫外分光光度法(UV)进行总环烯醚萜含量测定。2.采用孤养结合不可预见性慢性温和刺激(CUMS)方法建立抑郁小鼠模型,对小鼠应激造模4周,并通过宏观观察、体重、悬尾不动时间实验和糖水消耗率实验验证造模成功与否。分别灌胃氟西汀(2.6 mg/kg/d)、低(5.7 mg/kg/d)、中(11.4mg/kg/d)、高(22.9 mg/kg/d)剂量的TIV,连续给药2周,通过悬尾不动时间实验和糖水消耗率实验验证TIV的抗抑郁作用,酶联免疫法(ELISA)检测海马和结肠组织中的5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、P物质(SP)、促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)的含量。3.通过16S rDNA扩增子测序分析技术对小鼠结肠中粪便菌群进行分析,分别进行Alpha多样性、Beta多样性、不同分类水平下菌群的相对丰度分析,进而探究抑郁小鼠肠道菌群结构变化以及TIV对抑郁小鼠肠道菌群结构的调节作用。结果1.蜘蛛香生药材10.4 kg,提取分离纯化后得TIV量为190 g,该有效部位UV法检测总环烯醚萜含量为76.58%。2.造模后的行为学实验中,与正常组比较,造模组小鼠4min内悬尾不动时间非常显著性地升高(P<0.01),糖水消耗率非常显著性地降低(P<0.01),表明本实验采用孤养结合CUMS方法成功复制小鼠抑郁模型。经TIV治疗后,与模型组相比,阳性组和TIV高剂量组小鼠在4min内悬尾不动时间非常显著性地降低(P<0.01),糖水消耗率非常显著性地升高(P<0.01),TIV中剂量组小鼠4min内悬尾不动时间显著降低(P<0.05),糖水消耗率显著升高(P<0.05);阳性组、TIV中剂量组和TIV高剂量组小鼠海马组织中5-HT含量非常显著性地升高(P<0.01),阳性组小鼠结肠组织中5-HT含量非常显著性地降低(P<0.01),TIV高剂量组小鼠结肠组织中5-HT含量显著降低(P<0.05);TIV高剂量组小鼠海马组织中NE含量显著升高(P<0.05),TIV中、高剂量组小鼠结肠组织中NE含量显著降低(P<0.05);TIV中、高剂量组小鼠海马组织中SP含量非常显著性地降低(P<0.01),TIV高剂量组小鼠结肠组织中SP含量显著降低(P<0.05);阳性组和TIV高剂量组小鼠海马组织中CRF含量非常显著性降低(P<0.01),TIV中剂量组小鼠海马组织中CRF含量显著降低(P<0.05),阳性组和TIV高剂量组小鼠结肠组织中CRF含量非常显著性降低(P<0.01),TIV低、中剂量组小鼠结肠组织中CRF含量显著降低(P<0.05)。3.采用16S rDNA扩增子测序分析技术对小鼠肠道菌群分析,虽然各组小鼠肠道菌群在多样性和丰富度上无明显差异,但在相对丰度上存在差异趋势,尤其是优势菌门厚壁菌、变形菌和拟杆菌,结合相关报道和分析乳杆菌科、瘤胃菌科和拟杆菌属的相对丰度变化,推测其可能与抑郁症的发生密切相关,且TIV对抑郁小鼠的肠道菌群结构具有一定的调节作用。结论1.TIV具有改善抑郁障碍以及改善内脏高敏等症状的作用,其抗抑郁机制可能与升高海马中5-HT、NE等神经递质含量有关;而改善内脏高敏等症状的作用机制可能与通过降低结肠中5-HT、NE、SP、CRF神经递质含量,从而调节胃肠动力有关。2.肠道菌群中乳杆菌科、瘤胃菌科和拟杆菌属的相对丰度变化可能与抑郁症相关,TIV对抑郁小鼠肠道菌群结构具有调节作用。