近年来,干细胞移植已经被认为是修复神经损伤最具应用前景的治疗策略之一。该领域被广泛研究和关注的干细胞主要有胚胎干细胞、神经干细胞、骨髓基质干细胞和脐带血基质干细胞等。除了骨髓基质干细胞外,目前其它类型干细胞大多需要从异体获取,它们在运用过程存在较严重的道德伦理和免疫排斥等问题。而骨髓基质干细胞在取材过程对患者本身带来较大的痛苦。所以,有必要研究及寻求更好的干细胞来源。大量研究已经证实脐带血干细胞与骨髓基质干细胞的表型非常相似,也都具有高度的增殖和分化潜能。从发育生物学来看,脐带血实质上就是胎儿血。这也就说明,直到出生时人体血液中还存在大量的具有高度增殖和分化潜能的干细胞。鉴于此,本研究拟探讨成体外周血中是否还存在这些干细胞,并建立分离培养外周血基质干细胞(Peripheral blood derived mesenchymal stem cells, PBMSCs)的方法。由于施万细胞具有分泌大量神经营养因子,引导和促进神经再生的功能,它常常被应用于修复中枢和周围神经损伤。但是传统从外周神经分离培养施万细胞的方法明显限制了施万细胞的来源,近年来许多研究者均采取定向诱导的方法从干细胞分化获得施万细胞。所以,本研究在获得外周血基质干细胞的基础上,探讨将其在体内外诱导成定向诱导为施万细胞的方法,为进一步将其用于修复神经损伤打下基础。本研究分为三个部分。第一部分：PBMSCs的分离、培养与鉴定从SD大鼠取血分离培养PBMSCs,采用流式细胞术和免疫细胞化学法对其细胞表面抗原进行检测与鉴定,流式细胞术显示培养获得的PBMSCs中CD29、CD90、CD45、CD11b、CD106及CD49d的阳性率分别为99.96%、71.22%、46.62%、19.97%、10.76%和5.46%。免疫细胞化学法显示PBMSCs呈CD44和CD106阳性,CD34阴性。并用免疫细胞化学法检测BrdU作用4h后BrdU的阳性率。第2代PBMSCs BrdU阳性率为(34.1±4.3)%。以上结果显示外周血分离获得的干细胞具有基质干细胞的特性。第二部分：PBMSCs在体外诱导分化成为施万细胞PBMSCs经β-巯基乙醇、全反式维甲酸及复合条件培养基(1% N2、50ng/ml heregulin、5μM forskolin、10ng/ml bFGF及5ng/ml PDGF)等三个步骤向施万细胞定向诱导后,用免疫细胞化学法检测S-100和P75的表达。结果显示S-100和P75的阳性率分别是(75.2±4.1)%和(78.9±4.6)%。表明PBMSCs在特定的条件下可定向分化成为施万细胞。第三部分：PBMSCs在损伤坐骨神经内分化成为施万细胞制作大鼠坐骨神经夹伤模型后向损伤处移植GFP阳性PBMSCs。术后1w、2w、6w时取材、切片并进行进行形态学观察。结果发现,移植的PBMSCs在坐骨神经内能分化成为施万细胞样细胞,大量GFP阳性移植细胞表达施万细胞的标志蛋白S-100和P75。另可见GFP阳性移植细胞呈环状包绕NF阳性神经纤维,并表达成熟髓鞘的标志蛋白MBP。结果表明移植的PBMSCs能够在体内分化成为施万细胞,并具有形成髓鞘的功能。