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大豆是世界广泛种植的油料作物,也是我国最主要的粮食作物之一。然而,我国土壤质量普遍偏低,部分地区干旱、盐碱等自然灾害会严重影响大豆的产量甚至绝收。如果这些土地能够被一些作物利用,我国的粮食就不用那么依靠国外进口。因此,本研究分析了大豆Gm AKT1基因在不同胁迫条件下根和叶的表达情况,构建植物过表达载体p BASTA-Gm AKT1,通过花浸法将目的基因转化至野生型拟南芥中,并且对目的基因进行亚细胞定位研究和大豆发状根表型研究,为进一步探究Gm AKT1基因的功能奠定基础。主要研究结果如下:1.采用实时荧光定量PCR技术。分析大豆在不同非生物胁迫胁迫处理下根和叶的Gm AKT1基因的表达情况。结果显示:Gm AKT1基因在受到盐碱逆境胁迫初期表达量明显升高,叶中表达量是对照的3.65倍。在盐胁迫和盐碱胁迫1h条件下,Gm AKT1基因在根中的表达量明显升高,相对表达量是对照组的2.15倍和2.35倍。然而随着胁迫时间的增加,Gm AKT1基因的表达量无论是根中还是叶中都逐渐降低。在碱和干旱胁迫时表达量与对照组无明显变化。2.把大豆Gm AKT1基因构建到p Basta植物过表达载体中。通过Flroial Dip法将Gm AKT1转入到野生型拟南芥中,累计得到9株超表达基因拟南芥。3.通过对T2代转基因拟南芥植株进行分离比鉴定。有9个转基因拟南芥株系结果显示分离比约为3:1。符合孟德尔遗传定律,通过荧光定量PCR最终确定了表达量最高的3个株系。为进一步研究Gm AKT1基因功能提供植物材料。4.将Gm AKT1基因构建到p CAMBIA1302载体中。利用农杆菌注射法将Gm AKT1转入到烟草叶肉细胞中,通过激光共聚焦显微镜观察,证实Gm AKT1蛋白定位在细胞膜上。5.建立大豆发状根诱导培养体系,诱导转化超表达Gm AKT1的大豆发状根,分析转Gm AKT1的大豆发状根在盐胁迫下的基因表达情况,对转Gm AKT1的大豆发状根进行表型分析,并对其在盐胁迫下观察其气孔的变化。结果显示:转Gm AKT1的大豆发状根表达量与对照组相比明显升高,在逆境胁迫下,气孔与对照组相比闭合率较高。