第一部分：骨癌痛大鼠NKCC1和KCC2的表达变化　　目的：观察骨癌痛大鼠脊髓及DRG中NKCC1和KCC2的表达变化。　　方法：体重约180～200g的雌性SD大鼠27只，随机分为3组（n=9）:正常对照组（C组）、假手术组（S组）、骨癌痛组（BCP组）。BCP组大鼠于左侧胫骨干骺端注入Walker256肿瘤细胞悬液10μl，S组大鼠干骺端注入PBS液10μl，C组大鼠正常饲养。各组大鼠于造模前1天及造模后每天上午10点测定大鼠的机械缩足反射阈值。大鼠于造模d9麻醉后处死，提取大鼠L4~L6段脊髓及L2~L5段DRG组织，用实时荧光定量PCR及Western Blot方法检测脊髓及DRG中NKCC1和KCC2表达情况。　　结果：与C组比较，BCP组大鼠机械痛阈降低（P<0.01），脊髓KCC2 mRNA（P<0.01）及其蛋白（P<0.05）表达下调；DRG中NKCC1 mRNA（P<0.01）及其蛋白（P<0.05）表达升高；S组大鼠上述指标差异无统计学意义（P>0.05）。　　结论：骨癌痛大鼠DRG中NKCC1的表达上调，脊髓中KCC2的表达下调。　　第二部分：鞘内注射CLP257对脊髓KCC2表达及大鼠骨癌痛的影响　　目的：观察鞘内注射CLP257后，骨癌痛大鼠脊髓背角KCC2表达变化及疼痛行为学的相应改变。　　方法：体重约180～200g的雌性SD大鼠48只，随机分为4组(n=12)，假手术组（S组）、骨癌痛组（BCP组）、骨癌痛+溶媒组（DMSO组）、骨癌痛+CLP257组（CLP组）。除S组外，其余三组大鼠建立骨癌痛模型，CLP组大鼠建模后通过鞘内置管注射CLP257，DMSO组注射等量溶剂，S组大鼠未做特殊处理。各组大鼠于造模前d1及造模后d1~9测定机械痛阈；于d7给药前0.5h及给药后0.5、1、2、4、6h分别测定机械痛阈。造模d9取大鼠的L4~6脊髓组织进行实时荧光定量PCR、免疫荧光及Western Blot试验，检测脊髓中KCC2表达的改变。　　结果：与S组比较，BCP组大鼠脊髓KCC2 mRNA表达降低（P<0.05），蛋白表达也降低（P<0.05）；与BCP组比较，CLP组大鼠KCC2 mRNA表达增高（P<0.05），蛋白表达也升高（P<0.05）；与BCP组比较，CLP组大鼠给药后痛阈在2h和4h升高（P<0.05）；DMSO组上述指标差异无统计学意义（P>0.05）。　　结论：鞘内注射CLP257可以提高KCC2在脊髓的表达，部分缓解大鼠骨癌痛。　　第三部分：鞘内注射布美他尼对NKCC1表达和大鼠骨癌痛的影响　　目的：观察鞘内注射布美他尼后，骨癌痛大鼠DRG中NKCC1表达变化及疼痛行为学的相应改变。　　方法：体重约180～200g的雌性SD大鼠48只，随机分为4组(n=12)，假手术组（S组）、骨癌痛组（BCP组）、骨癌痛+溶媒组（DMSO组）、骨癌痛+布美他尼组（BUM组）。除S组外，其余三组大鼠建立骨癌痛模型，BUM组大鼠建模后通过鞘内置管注射布美他尼，DMSO组注射等量溶剂，S组大鼠未做特殊处理。各组大鼠于造模前d1及造模后d1~9测定机械痛阈；于d7给药前0.5h及给药后0.5、1、2、3、4、5、6h分别测定机械痛阈。造模d9处死大鼠，取大鼠的L2~L5段DRG组织进行实时荧光定量PCR、免疫荧光及Western Blot试验，检测DRG中NKCC1表达的改变。　　结果：与S组比较，BCP组大鼠DRG NKCC1 mRNA表达升高（P<0.01），蛋白表达也升高（P<0.05）；与BCP组比较，BUM组大鼠NKCC1 mRNA表达降低（P<0.01），蛋白表达也降低（P<0.01）；与BCP组比较，BUM组大鼠给药后痛阈在1h、2h、3h、4h升高（P<0.05）；DMSO组上述指标差异无统计学意义（P>0.05）。　　结论：鞘内注射布美他尼可以降低NKCC1在DRG中的表达，可部分缓解骨癌痛。