鸡传染性支气管炎(infectious bronchitis, IB)是一种由传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus, IBV)引起的急性、高度接触性传染病。IBV血清型众多,不同血清型毒株之间的交叉免疫保护作用不好。研究表明,IBV的血清分型和基因分型具有一致性。由于Mass型疫苗在我国已经广泛使用多年,与目前主要流行的QX型毒株遗传关系较远,在实际生产中免疫保护效果并不理想。因此,研制QX型弱毒疫苗对于预防和控制我国IB的发生和流行具有重要意义。1.QX型鸡传染性支气管炎病毒QXL株的鉴定对QX型IBV QXL毒株的生物学特性进行了研究。纯净性研究表明,毒株无细菌、支原体及其他外源病毒污染。致病性研究表明,QXL毒株能够引起15日龄的SPF雏鸡100%发病,40%死亡；剖检病死鸡,可见气管及支气管的管腔中有大量炎性或干酪样渗出物；肾脏肿大,输尿管中有大量尿酸盐沉积、外观呈大理石纹状；组织病理学及免疫组织化学检查发现,毒株对气管及肾脏的损伤较为严重。此外,QXL毒株对雏母鸡的输卵管及卵巢也具有较强的致病力；与健康对照组相比攻毒组鸡的产蛋量下降50%左右；攻毒后180d,剖检发现有近27%鸡有严重的腹膜炎,36%鸡有卵巢炎症,卵巢发育不良,卵子变性坏死,呈红褐色。组织病理学研究发现,攻毒组鸡卵巢组织中有大量的异噬性粒细胞浸润,卵子坏死脱落；免疫组织化学研究发现,在输卵管和卵巢组织中均可以广泛的检测到病毒抗原。2.QX型鸡传染性支气管炎病毒QXL株的致弱QXL毒株经SPF鸡胚连续传代,随着传代次数的增加,毒株对鸡胚的适应性越来越好。为了评价QXL毒株在连续传代后其致病力的变化,本研究选择不同代次毒株接种1-3日龄的SPF雏鸡,观察其发病及死亡情况,并进行组织病理学检查。结果表明,10-30代毒株能够引起80%以上雏鸡发病,20%以上雏鸡死亡；50代毒株的致病力显著降低,仅导致20%的雏鸡发病；接种70代及之后各代次毒株的鸡,无发病或死亡,各组织器官均也无异常。对QXL第70、80、85、87、90、100、110、120代毒株免疫原性的研究。结果表明,以上各代次免疫组鸡,在受到同源强毒攻击时,均可提供90%以上保护。因此,70代及之后各代次毒株致病力充分降低的同时,仍然保留有良好的免疫原性。我们选取第87代毒株为进一步研究的对象,命名为QXL87株。对QXL不同代次毒株S1基因序列的分析,结果表明,在第5代到第120代的传代过程中,仅有4个核苷酸位点发生突变,并仅导致相应的2个氨基酸残基发生改变。由此推测,IBV QXL毒株致病力和免疫原性的改变可能还与其他一些基因的变化有关。3.QX型鸡传染性支气管炎病毒QXL87株弱毒疫苗的临床前研究QXL87株鸡体内分布及排毒规律研究,结果表明,接种后第5d及第7d各脏器均能分离到病毒,而接种后的第15d各脏器均未分离到病毒。毒力反强试验研究表明,QXL87株经SPF鸡连传5代,没有出现毒力返强现象。研究表明,QXL87株对雏母鸡的输卵管及卵巢已无致病力。综上所述,QXL87株是理想的QX型IB弱毒疫苗候选毒株。