研究目的原发性肝癌(以下简称肝癌)是最常见的恶性肿瘤之一,其高发病率和死亡率严重威胁着人类健康。肝癌起病隐匿,早期缺乏典型的临床症状,大多数患者确诊时已处于中晚期,错失最佳治疗时机,故整体预后欠佳。早发现、早诊断和早治疗是改善肝癌患者预后的关键。其中,寻找能够用于原发性肝癌早期诊断和靶向治疗的生物标记物是解决其早期发现难的重要一环。泛素-蛋白酶系统广泛存在于真核细胞内,参与细胞内信号的传导、周期的调控以及细胞凋亡等。泛素蛋白酶系统包括泛素活化酶E1,泛素结合酶E2、泛素链接酶E3等。近年来,诸多文献报道泛素结合酶E2家族蛋白与多种肿瘤发生发展密切相关。然而,泛素结合酶E2Z(Ubiquitin conjugating enzyme E2Z,UBE2Z),作为泛素结合酶重要成员之一,目前尚缺乏UBE2Z在原发性肝癌中作用的研究。因此,本研究旨在探究泛素结合酶E2Z(Ubiquitin conjugating enzyme E2Z,UBE2Z)在原发性肝癌中的表达及临床意义;以及研究下调UBE2Z对肝癌细胞增殖、侵袭及迁移的的影响,并探索其可能的机制。研究方法1.利用癌症基因图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)和Ocomine数据库中的现有肝癌样本数据,研究了UBE2Z的表达水平及其与患者预后的关系。2.通过UCSC xena网站(https://xena.ucsc.edu)下载与TCGA数据匹配的目的基因拷贝数变异及甲基化数据,研究该基因表达上调的可能作用机制。3.利用免疫组织化学技术检测临床肝癌标本中UBE2Z的表达水平,利用Western-Blot实验检测人肝癌细胞中UBE2Z的表达情况。4.利用si RNA沉默UBE2Z基因后,通过CCK-8试验、划痕试验和Transwell试验检测UBE2Z低表达对肝癌细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力的影响。研究结果1.UBE2Z在肝癌组织中表达显著增高,可以作为判断肝癌预后的有效指标;2.UBE2Z高表达与其基因复制子扩增有关,且UBE2Z DNA甲基化部分参与调控该基因的表达3.下调UBE2Z能够抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力4.UBE2Z能够通过调控Erk和stat3信号通路促进肝癌的发生发展