苔藓植物是最原始的高等植物。其物种繁多,分布广泛,资源丰富。近年来,由于环境污染,气候变化,开采不当等原因,许多苔藓植物已经濒临消失甚至已经灭绝,组织培养是对苔藓植物的种质保存保育和繁殖的重要方式之一。同时,苔藓植物组织培养也是对苔藓植物进行科学研究的重要技术前提。苔藓植物在组织结构和生活习性与其它高等植物相差较大,常规的培养方案对其并不适合。因此,需要开展对于不同的苔藓植物的组织培养条件进行深入细致的比较性研究。本论文以模式植物小立碗藓(Physcomitrella patens)和上海野生细叶小羽藓(Haplocladium microphyllum)为材料建立了一套可行性较强的苔藓组织培养取材、培养、检测的系统,并探究了不同组织培养营养条件对体系中苔藓生长发育的影响。我们主要考察氮、磷、钾和pH等条件,结果表明,磷和钾对小立碗鲜和细叶小羽藓的生长影响不明显。而PH和氮对这两种苔藓的生长非常重要,而且,不同苔藓植物的要求明显不同,相同苔藓植物的不同组织也不同。小立碗藓最适生长pH都为6-7；细叶小羽藓最适生长pH为7。在pH小于6的环境中,小立碗藓的配子枝出现茎褐化、叶片失绿、原丝体细胞变短,并且pH小于4条件下原丝体基本死亡,而细叶小羽藓的配子枝在pH3的条件下依然存活。pH8-9的情况下,小立碗鲜配子枝有假根,伸长生长未明显被抑制,原丝体更易于分化形成轴丝体；而细叶小羽藓则产生较多假根,伸长生长受到明显抑制。对于小立碗藓,在一定范围内,氮浓度的提高有利于诱导原丝体的形成；同时抑制配子枝的伸长,在较高浓度氮(0.4mol/L)的条件下,茎叶体依然生长正常；提高氮浓度抑制轴丝体的分化,绿丝体生长的比例明显增加。与之不同的是,较高浓度的氮(0.04mol/L)会明显抑制细叶小羽藓配子枝的伸长,在较低浓度氮(0.0016mol/L)甚至无氮环境中,细叶小羽藓配子枝生长良好。本研究结果为实验室对于细叶小羽藓和小立碗藓的最佳组织培养条件提供了重要的指导,同时也初步为苔藓的组织培养和繁殖提供了良好的平台。另外,本研究中我们初步优化了原生质体制备和原生质体再生的条件,使得原生质体的数量达到甚至超过标准(1.6×106个/m1),再生率提高到2.8%。PEG介导的小立碗藓原生质体的转化方法高效、简单,适用于任何实验室。此系统的建立并稳定运行对分子生物学的研究具有重要意义。