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研究背景系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种典型的波及全身多个系统和以及多个器官,临床表现复杂,以大量自身抗体产生、补体激活和免疫复合物沉积为主要特征的自身免疫性结缔组织病。该病的发病人群有性别和年龄趋势,发病率男女性别比约为1∶9且好发于育龄期女性。迄今为止,导致SLE免疫异常的病因以及发病机制仍不明确。在SLE中,由于T/B细胞等免疫细胞自我耐受状态被破坏以及产生大量的自身抗体从而造成全身性或局部的组织损伤和器官损害。因此了解自我耐受状态被破坏和自身抗体产生的内在机理成为了研究的重点。而细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)代谢失衡引起的细胞凋亡的紊乱是生成自身抗体的重要来源,也是体液免疫和细胞免疫失调的主要原因。因此,研究SLE病人和对照T/B细胞中ROS表达水平的变化对进一步阐述SLE发病机制有重要的意义。目的分别对SLE病人和对照检测其ROS在外周血T/B细胞内的表达水平,并将其表达水平在包括各种主要的临床表现及临床实验室指标的不同组间进行比较,包括SLE患者以及健康对照组;依据SLE疾病活动度评定的活动期SLE患者和稳定期SLE患者;有狼疮性肾炎和未并发狼疮性肾炎组;抗-RNP抗体阳性组和抗-RNP抗体阴性组等,为进一步阐述疾病的发病机制和改善治疗方法提供科学依据。方法本实验所用的血液样本取自于安徽医科大学附属省立医院和安徽医科大学第一附属医院。实验共收集病例57例,对照30例。所有对照均为按照性别和年龄进行匹配的健康志愿者。实验所用的调查问卷来自本课题组实验室,是在参考SLE疾病活动性指数(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)量表及SLE的诊断及分类量表的基础上自行设计而成。问卷包括了患者的一般流行病学情况、主要临床指标以及实验室指标。采用密度梯度离心法提取人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)。利用流式细胞仪(flow cytometry,FCM),以及FITC、PE、APC三染色法来检测PBMCs T/B细胞内ROS表达水平。所有数据均由SPSS 10.01软件来进行统计分析。结果SLE患者组与健康对照组相比,其外周血T细胞内ROS平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)增高,且差异有统计学意义(Z=-5.02,P<0.001)。与T细胞上的表达相反,SLE患者B细胞内ROS的表达低于健康对照组(Z=-3.18,P=0.001)。在外周血T细胞上,SLE患者伴有狼疮性肾炎组ROS表达水平高于非狼疮性肾炎SLE患者,差异有统计学意义(Z=-2.02,P=0.044).但在外周血T细胞和B细胞内ROS的的表达水平与疾病活动度均无相关。同时,本研究也将各项重要的SLE的临床指标和实验室指标与ROS的表达水平之间的关系进行了进一步的探讨,研究结果表明:SLE病人T细胞内ROS的高表达与蛋白尿生成有关,抗核抗体和抗-RNP抗体高的SLE患者其ROS在B细胞内的表达水平均高于低抗核抗体和抗-RNP抗体SLE患者。除此之外,抗-ds DNA抗体阳性患者与抗-ds DNA抗体阴性患者相比,抗Sm抗体阳性患者与无抗Sm抗体阴性患者相比,抗-SSA抗体阳性患者与抗-SSA抗体阴性患者相比等其他实验室指标和临床指标在组间比较差异均无统计学意义(均有P>0.05)。结论SLE患者的外周血T细胞内ROS的表达水平增高,外周血B细胞内ROS表达水平降低,这些结果提示我们外周血T/B细胞内ROS的异常表达可能与SLE的发病密切相关,但其具体作用机制仍需进一步研究进行阐明。