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目的:
考察土木香内酯对A375肿瘤细胞生长、细胞凋亡和细胞周期的影响，并探讨土木香内酯促凋亡和阻滞细胞周期的作用机制，为土木香内酯的临床研究提供实验基础。
方法:
1.采用MTT法，研究土木香内酯对体外培养的人肺癌细胞株A549、人肺癌细胞株H1299、人胰腺癌细胞株PANC1、人前列腺癌细胞株PC3、人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y、人黑色素瘤细胞株A375增殖的影响，来筛选出细胞瘤株模型。
2.通过MTT、细胞集落、TUNEL、流式细胞，研究土木香内酯对A375细胞凋亡的影响。采用流式细胞周期分析、磷酸化组蛋白H3检测，研究土木香内酯对A375细胞周期的影响。
3.采用westernblot法，研究土木香内酯促进A375细胞凋亡的机制。通过westernblot、免疫荧光共聚焦、微管聚合实验、RT-PCR、基因芯片杂交技术，研究土木香内酯对A375细胞周期阻滞的机制。
4.通过裸鼠动物体实验，研究土木香内酯对A375肿瘤细胞在体内生长的影响。
结果:
1.MTT法分析显示，土木香内酯对体外培养的人肺癌细胞株A549、人肺癌细胞株H1299、人胰腺癌细胞株PANC1、人前列腺癌细胞株PC3、人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y、人黑色素瘤细胞株A375增殖具有显著的抑制作用。
2.土木香内酯对A375细胞具有抑制细胞生长和促进细胞凋亡的作用;土木香内酯可将A375细胞周期有效阻滞在G2/M期。
3.土木香内酯可以激活A375细胞caspase家族蛋白中的剪切的caspase3、剪切的caspase9、剪切的PARP。
4.土木香内酯可以降低TUBA1C和TUBA3C的mRNA表达，特异性的降解α-tubulin，抑制纺锤体的形成，同时增加α-tubulin调控microRNA中hsa-miR-4516、hsa-miR-4651的表达。
5.裸鼠动物实验表明土木香内酯对A375在动物体内生长有显著的抑制作用。
结论:
1.土木香内酯在体内外均具有显著的抑制A375肿瘤细胞生长的作用。这可能与土木香内酯激活caspase家族蛋白活性，促进A375肿瘤细胞的凋亡，阻滞细胞周期在G2/M期有关。
2.机制研究表明，土木香内酯显著增加microRNA中的hsa-miR-4516、hsa-miR-4651的表达，降低TUBA1C和TUBA3C的mRNA，抑制α-tubulin的表达和纺锤体的形成。
3.土木香内酯在动物体内同时具有抑制肿瘤生长的作用，故具有一定的临床开发价值。