提高吡喹酮杀血吸虫效果的方法研究

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目的:寻求提高吡喹酮杀血吸虫效果的药物或方法。 方法:选择两种不同配方的中药免疫增强剂;制备日本血吸虫表膜抗原多克隆和单克隆抗体;分别将其与吡喹酮联用治疗血吸虫感染小鼠,比较观察各联合用药和单一吡喹酮用药杀不同发育期血吸虫的效果;用ELISA法、免疫荧光染色、免疫病理观察等方法分析联合用药提高杀虫效果的机制;用SDS-PAGE和Western-blot等方法对制备的表膜抗原及其多克隆抗体和单克隆抗体的免疫特性进行鉴定。 结果:1.两中药制剂分别将吡喹酮的杀虫率提高33.97%和41.18%,且不加重虫卵肉芽肿病变,比较测试各组小鼠特异性抗体水平显示,中药免疫增强剂可提高特异抗体生成;2.在小鼠感染后2d、14d和35d将SjAWMAg抗血清与吡喹酮联合用药,其杀虫效果比单用吡喹酮组分别提高了38.79%,29.80%和46.82%,减卵率分别提高了62.04%,42.78%和29.81%,Western-blot分析表明SjAWMAg抗血清与肺、肝期童虫抗原存在交叉反应;3.成功建立了3个分泌SjAWMMcAb的细胞株,鉴定显示,抗体类为IgG,可识别SjAWMg 5个不同分子量分子,与血吸虫成虫表膜可发生特异性反应,3B6和1C2两株McAbs分别与吡喹酮联用的杀虫效果提高了41.78%和24.12%。 结论:1.自配伍的两中药免疫增强制剂均可提高吡喹酮杀血吸虫效果,其机制可能与促进宿主免疫应答,增强特异性抗体生成有关;2.抗SjAWMAg多抗和两株单抗均可与吡喹酮发挥联合杀虫作用,其中前者还可对不同发育期童虫有杀伤效果。由此,证明体液免疫在吡喹酮杀虫机制中具有重要作用。
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