哺乳动物精子通过附睾的运输、保护和储存过程中,获得受精能力,是精子成熟和储存的主要场所。精子也和其他任何一种细胞一样面对氧化损伤。精子对脂质过氧化、DNA损伤的进攻极为敏感,从而影响活力及受精能力。附睾为精子提供免受外界压力的环境并促进其成熟。附睾含有一系列抗氧化剂,包括谷胱甘肽过氧化物酶5(GPx5),GPx5可以保护精子免受氧化应激,维持公畜生殖道内自由基正常水平,促进精子发育成熟,其在提高雄性动物繁殖力上发挥着重要作用。国内现没有关于GPx5基因在骆驼附睾中的研究,因此,本研究以骆驼为研究对象,检测了不同年龄段(三岁、五岁、六岁)骆驼附睾不同部位GPx5的表达规律。研究结果如下:1.采用荧光定量PCR技术检测GPx5基因在不同年龄骆驼附睾不同部位上的mRNA水平表达情况。结果表明:各年龄阶段(三岁、五岁、六岁)骆驼附睾表达量存在差异。在三岁骆驼、五岁骆驼及六岁骆驼附睾头部为GPx5 mRNA的主要表达部位,表达量极显著高于附睾体部和附睾尾部(P<0.01)。五岁骆驼附睾头部表达量极显著高于三岁骆驼和六岁骆驼(P<0.01),三岁骆附睾头部表达量与六岁头部表达量无显著差异(P>0.05)。三岁骆驼,五岁骆驼,六岁骆驼附睾体跟附睾尾仅检测到微量GPx5基因表达。2.利用Western blot技术检测不同年龄骆驼附睾不同部位上的蛋白水平表达情况。免疫印迹结果表明:GPx5蛋白在各年龄阶段(三岁、五岁、六岁)骆驼附睾不同部位均有表达。骆驼不同年龄,附睾相同部位的表达量也有明显差异。通过进一步灰度分析结果显示,三岁骆驼,五岁骆驼,六岁骆驼附睾头是GPx5蛋白主要表达区域,五岁骆驼GPx5蛋白在附睾头的表达量均极显著高于三岁骆驼和六岁骆驼(P<0.01),而三岁骆驼附睾头GPx5蛋白表达量与六岁骆驼附睾头GPx5蛋白表达量差异不显著(P>0.05)。各年龄段相同部位的比较中,可以看到,五岁骆驼附睾各部位相对表达量都显著高于其他两个年龄段(P<0.05)。3.采用免疫组化技术检测GPx5蛋白在不同年龄骆驼附睾不同部位上的蛋白分布情况。免疫组化结果表明:三岁骆驼,五岁骆驼,六岁骆驼GPx5蛋白主要在附睾头上皮细胞质及静纤毛上,附睾体和附睾尾在上皮细胞的静纤毛中均少量表达。而且在三岁,五岁和六岁年龄阶段骆驼附睾腔中精子上都存在GPx5阳性信号。结果显示,GPx5蛋白主要在骆驼附睾头部上皮细胞质及静纤毛表达,附睾体跟附睾尾少量表达。