微拟球藻是一类自养的单细胞真核藻类，具有较高的光合作用效率、生物量和油脂含量，并富含二十碳五烯酸(EPA)。近年来，该属的种类已被认为是研究微藻产油的模式类群，多个藻株的全基因组序列已经公布，所有海洋已定种的遗传转化体系也已建立。作为该属中唯一的淡水种类，湖泊微拟球藻的基因组序列尚未测定，其遗传转化方法也未见报道。基于此，本研究首先建立了湖泊微拟球藻的遗传转化方法，然后根据外源基因随机插入的特性，挑取抗性转化子构建突变体库，从突变体库中筛选高含油突变株，并通过对突变株中抗性基因插入位点的分析阐述油脂高效合成的分子机理。研究旨在为快速获取优良目的性状的突变株提供了一个有效手段。主要研究结果如下:　　1.确定了利用博来霉素作为湖泊微拟球藻的抗性筛选标记及其最适的浓度(0.1μg/ml)。以湖泊微拟球藻自身β-tublin基因启动子和三角褐指藻fcpA终止子驱动和终止来源于细菌的sh ble抗性选择基因，构建了一个转化载体pPha-T1-TUB-KR98。将线性化后的质粒以电穿孔的方法转化湖泊微拟球藻，通过抗性平板筛选，并经液体培养基连续传代后，得到了可以稳定遗传的转化子。　　2.从上述约300个转化子中随机挑选30个与野生型进行了比较。利用薄层层析比较三酰基甘油含量，10 d和12 d检测的油含量均高于野生型的突变株有11株，占比为37％。其中突变株G5的油含量在12 d比野生型增加超过50％。利用光密度OD730值比较生长，有9个突变株的相对生物量高于野生型。对以上筛选得到的油含量及生长均优于野生型的两个突变株K26和G5的总脂及其脂肪酸组成进一步分析显示，两个突变株总脂的多不饱和脂肪酸含量更低，其脂肪酸组成更符合作为生物柴油原料的标准。　　3.我们用染色体步移的方法对突变株K26和G5的外源基因插入位点进行了初步分析。对扩增得到的长约1kb的片段进行同源比对后没有发现同源序列，由于湖泊微拟球藻基因组尚未测定，因而尚无法确定抗性插入片段如何影响油脂合成的。