桉树枝瘿姬小蜂生殖生物学研究

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桉树枝瘿姬小蜂(Leptocybe invasa Fisher&LaSalle)隶属膜翅目Hymenoptera,姬小蜂科Eulophidae,是桉属植物的专性寄生物种。最初仅发现其以雌性成虫为模式标本并认为其专营孤雌生殖,而后在土耳其、印度和中国发现其雄性成虫,且在中国比例较高。为了探究桉树枝瘿姬小蜂的性比决定因素,为今后该虫防治提供科学依据,本文进行了以下研究:1.观察比较了雌、雄及橙红色虫体外部形态特征及生殖系统形态结构,发现雌虫与橙红色虫体虽然存在着体色、腹部大小的差异,但它们的生殖系统结构相似,都由卵巢、输卵管及产卵管等结构组成。在实验室恒温条件下,连续观察桉树枝瘿姬小蜂从羽化至死亡的所有行为,发现雌雄之间存在交配行为。但未发现其橙红色成虫与雄性成虫的交配现象。而在实验室恒温条件下,通过两性生殖方式产生的后代中,未发现橙红色虫体。2.在自然条件下,自2013年8月~2016年9月对广州华南农业大学校园内以窿缘桉(Eucalyptus exserta)为寄主植物的桉树枝瘿姬小蜂进行了全年的羽化情况调查。结果显示该虫在广州地区自四月份开始羽化,六月份达到羽化高峰期。从七月份开始,雌性成虫比例开始下降,雄性与橙红色虫体的比例开始上升,到九月份,雄性成虫比例达到最高值为23%。橙红色虫体在十月份达到最高比例为27%。气象因子温度对性比统计数据表明:桉树枝瘿姬小蜂羽化总数、雄性和橙红色成虫的比例与温度呈正相关性。同时桉树枝瘿姬小蜂橙红色成虫的羽化时间晚于雌虫与雄虫。3.在实验室人工气候箱内,通过设置温度梯度研究桉树枝瘿姬小蜂羽化情况结果分析得出在19℃~28℃温度梯度之间,有性生殖产生的桉树枝瘿姬小蜂雌性成虫F1代的雄性比例都呈现升高的趋势;但温度上升至28℃时,桉树枝瘿姬小蜂雌性成虫F1代的雄性比例出现下降现象。对窿缘桉上单个虫瘿的羽化雄性比例与温度的关系分析结果显示,单个虫瘿的羽化雄性比例在19℃~31℃温度梯度之间不存在显著差异。4.对桉树枝瘿姬小蜂体内共生菌种类鉴定的研究。对雌性与雄性成虫进行Ars23s区段扩增和序列测定,获得与肠杆菌属、大肠杆菌(E.coli)等的对应序列同源性达99%。利用rRNA-16s特异扩增获得与肠杆菌属细菌(Enterobacter cloacae)对应序列同源性达96%~98%的序列。利用Eubacterical基因扩增获得与一种未经培养的细菌对应序列同源性达98%,具体物种还需进行进一步鉴定。
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