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目的和背景:随着人口的老龄化,骨性关节炎逐渐成为影响人类健康和生活质量的疾病。骨性关节炎最重要的病变是关节软骨的破坏,关节软骨的合成和分解代谢的失衡,关节软骨炎症介质,软骨基质,应力等通过软骨细胞的特定的受体,进而通过细胞内信号转导途径,影响细胞核内的炎症因子和基质金属蛋白酶的基因表达,从而促进软骨的分解代谢。研究这一过程中软骨细胞内信号转导的变化和作用,对于阐明骨性关节炎的发病机制具有重要的意义,对于骨性关节炎的预防和治疗具有重要的意义。近年来的文献提示,p38信号转导途径可能对关节软骨细胞的分解代谢具有重要的作用,本研究通过建立大鼠骨性关节炎动物模型,研究p38信号转导途径这一重要的细胞内转导途径在骨性关节炎软骨的激活情况及其与在体骨性关节炎软骨破坏的关系。
方法:本实验通过采用手术切断S-D大鼠一侧膝关节前交叉韧带加切除内侧三分之一半月板,另一侧则不作特殊处理,作为对照组,术后笼养,任其自由活动1个月后取标本,膝关节股骨端软骨作Western-blot检验,胫骨端取下作病理切片,4%多聚甲醛固定,EDTA脱钙,通过关节软骨的HE染色和甲苯胺染色镜下观结合肉眼观,对骨性关节炎软骨进行软骨破坏程度的评分,通过配对设计的秩和检验来检验软骨破坏在实验侧和正常侧的差异性,用免疫组化和Western-blot等方法研究了p-p38(激活状态的p38MAPK)在骨性关节炎软骨和正常软骨中的表达,并用配对t检验检验两组的差异性,用spearman等级资料的相关性检验对关节软骨中p-p38的相对光密度值和其相应的软骨破坏评分进相关性分析。所有统计均用SPSS11.5软件进行。
结果:成功的建立了大鼠骨性关节炎动物模型,共有12对合格标本,软骨破坏评分在实验侧明显高于对照侧,P<0.01。骨性关节炎组全层关节软骨中p-p38免疫组化染色阳性的关节软骨比例高于正常对照组,P<0.05,骨性关节炎组关节软骨免疫印迹检测p—p38的相对光密度值明显高于正常对照组,P<0.01。将相对光密度值与其对应的软骨细胞评分进行相关性分析,发现两者有明显的相关性,R=0.892,P<0.01。
结论:p38信号转导途径在骨性关节炎软骨中被激活,骨性关节炎组中关节软骨整体上比正常组p-p38的含量要高,这一结果在免疫印迹检测中更加敏感,将p-p38的含量与关节软骨损伤度评分进行相关分析,两者具有统计学上的相关性,这一结果与我们的假说相符与众多文献所报道的体外实验的结果相符。我们得出如下结论:1)p38MAPK的激活(p-p38)在骨性关节炎中的是明显高于正常关节组的;2)p38MAPK的激活与骨性关节炎软骨的破坏是呈正相关的,p38MAPK可能是骨性关节炎发生发展的共同通路,这一信号转导途径可能在骨性关节炎发生发展中有重要的作用;3)阻断p38-MAPK可能是预防和治疗骨性关节炎的新靶点,阻断之可能有利于骨性关节炎的防治,值得进一步的开展研究。