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背景糖尿病足溃疡(Diabetic foot ulcer,DFU)作为一种严重的糖尿病并发症,其中50%患者溃疡会被感染,增加潜在的截肢风险,并且69%的糖尿病截肢患者的存活时间不超过5年。尽管新的治疗方法已取得长足的进展,但目前对于糖尿病足溃疡反复感染尚无有效治疗方法,给患者和家庭带来了沉重的生理和心理负担。近年来,干细胞移植被认为是治疗糖尿病足溃疡的有效方法。经血源子宫内膜干细胞(Menstrual blood derived endometrial stem cell,MenSCs)凭借其来源丰富,分离获得方法无创性,增殖速度快,逐渐成为干细胞治疗的研究热点。目的1.体内外检测MenSCs促血管及促肉芽形成的能力;2.检测MenSCs对糖尿病以及伤口愈合的影响。方法1.通过蛋白质芯片从分子水平检测MenSCs条件培养基促血管再生因子的表达;构建MenSCs与人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)共培养体系,分别通过Transwell迁移实验和粘附实验,检测MenSCs对HUVECs增殖、迁移和粘附的影响;通过小管形成实验,体外检测MenSCs条件培养基促小管形成的能力;通过基质胶栓实验,体内检测MenSCs促血管形成情况。2.通过MTT法、Transwell迁移实验和粘附实验,检测MenSCs条件培养基对皮肤成纤维细胞(BJ细胞)增殖、迁移和粘附的影响;构建MenSCs与BJ细胞的共培养体系,并在高糖及LPS存在的条件下,检测MenSCs对BJ细胞内活性氧产生的影响。3.构建糖尿病足溃疡大鼠模型,检测模型鼠MenSCs移植后1d、3d、5d、7d和9d的空腹血糖变化、伤口愈合情况;随后检测9d时实验动物糖耐量变化,并对模型鼠胰腺切石蜡片后进行HE和Ki67染色,对肝脏石蜡切片后进行PAS染色。结果1.蛋白质芯片结果显示MenSCs可以分泌多种促血管再生因子;并且MenSCs可以增强HUVECs的迁移和粘附能力,在小管形成实验中经MenSCs条件培养基作用的HUVECs所形成的的小管具有更多的节点、结点、分支数,且小管长度明显增加;随后,基质胶栓实验结果表明MenSCs处理组所形成的血管密度明显增大。2.MTT法、Transwell迁移实验和粘附实验结果显示MenSCs可显著促进BJ细胞的增殖、迁移和粘附;并在共培养体系中MenSCs的存在可显著抑制BJ细胞内活性氧的产生。3.成功构建了糖尿病足溃疡大鼠模型,在MenSCs移植后5d,移植组大鼠空腹血糖开始下降,且在9d时移植组大鼠的糖耐量能力也明显提升;随后HE和Ki67染色结果亦显示移植组大鼠的胰岛得到明显恢复,且移植组大鼠肝脏中糖原合成与储存能力显著增强;进一步在9d移植组大鼠足部伤口面积和对照组相比具有统计学差异,移植组大鼠伤口面积比对照组缩小约35%。结论1.体内外结果显示MenSCs可以促进血管及肉芽的形成;2.MenSCs移植可缓解糖尿病症状,并促进糖尿病足溃疡伤口愈合。