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【研究背景】 肺癌是目前全世界发病率和死亡率最高且增长最快，对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤。转录因子(transcriptionfactor)是一群能与基因5`端上游特定序列专一性结合，从而保证目的基因以特定的强度在特定的时间与空间表达的蛋白质分子。因其存在的广泛性和调控靶基因的多样性，与肿瘤细胞的生长、增殖、凋亡、浸润转移及血管生成等各个环节密切相关。随着对转录因子及其作用机制的深入研究，针对转录因子活化与抑制从不同环节寻找药物用于靶向治疗和预防与转录因子调控相关的肿瘤疾病，已成为当今新的研究热点，有望成为研究新型抗肿瘤药物作用机制的有效途径。 FOXA1作为一种重要转录因子，在机体生长发育和肿瘤发生及转移中起重要作用。其在不同肿瘤中扮演不同的角色。因此，我们研究探索FOXA1与非小细胞肺癌的临床相关性，探讨FOXA1作为肺癌治疗靶点的可能性。 【研究目的】 本研究非小细胞肺癌组织标本为主要研究对象，研究FOXA1与非小细胞肺癌的临床相关性，探索FOXA1可否成为肺癌发生、侵袭转移相关的有效分子标记物及可能的治疗靶点。 【研究方法】 1.用RT-PCR检测FOXA1在多株非小细胞肺癌细胞株mRNA表达情况。 2.提取非小细胞肺癌和癌旁正常肺组织RNA，通过RT-PCR研究FOXA1mRNA水平变化来确定它在肺癌及癌旁组织中的表达是否有差异。 3.提取非小细胞肺癌和癌旁正常肺组织蛋白，通过WesternBlot研究FOXA1蛋白水平变化来确定它在肺癌及癌旁组织中的表达是否有临床差异。 4.用免疫组化比较非小细胞肺癌原发灶和远处转移灶组织中FOXA1的表达差异。 5.用免疫组化比较I期病人肺癌组织与IV期病人原发灶及转移灶组织中FOXA1表达差异。 6.统计学方法：采用SPSS19.0以及GraphPadPrism6Demo软件进行统计分析，实验数据以均数±标准差表示，定量资料组间比较采用t检验分析，定性资料组间二分类比较采用χ2检验，IHC评分采用秩和检验。检验水准P=0.05。P<0.05为差异有统计学意义。 【研究结果】 1.RT-PCR检验FOXA1在非小细胞肺癌细胞株中的表达情况： RT-PCR检测FOXA1在肺癌细胞株95C、95D、A549、H460、H1975及PC9中的表达水平，结果显示，FOXA1在H460细胞中的表达水平显著高于在其他细胞中的表达水平，在95C细胞中的表达水平最低。H460细胞FOXA1的平均表达水平是95C细胞的109倍。 2.FOXA1在非小细胞肺癌组织及癌旁正常组织中的表达情况： 我们用RT-PCR实验检测43例非小细胞肺癌组织及癌旁正常组织中的FOXA1mRNA表达情况。经过统计分析，描绘散点图发现，FOXA1mRNA在非小细胞肺癌组织中的表达水平为0.7311±0.09526，在癌旁组织表达水平为0.4856±0.05568，两者表达水平存在差异（P<0.05）。分层统计分析这43例组织FOXA1表达情况，结果显示，这43例中，FOXA1mRNA在非小细胞肺癌组织中的表达水平与年龄有一定相关性，在年龄小于等于55岁患者的非小细胞肺癌组织中明显高于癌旁组织（P<0.05）。FOXA1与非小细胞肺癌的病理类型（腺癌及鳞癌）（P=0.362）、性别（P=0.331）、吸烟史（P=0.639）、家族史（P=0.641）、肿瘤大小（P=0.571）、分化程度（P=0.531）及淋巴结转移（P=0.904）无明显相关。 Westernblot结果显示，在其中40例非小细胞肺癌中癌组织与癌旁组织的蛋白（其中有3例组织未能提取到满意的蛋白）表达无明显差异。我们对这40例肺非小细胞肺癌进行分层统计，结果显示，FOXA1与肺癌的病理类型（腺癌及鳞癌）（P=0.533）、性别（P=0.592）、年龄（P=0.199）、吸烟史（P=0.5）、家族史（P=0.204）、肿瘤大小（P=0.273）、淋巴结转移（P=0.649）及分化程度（P=0.192）无明显相关。 3.IHC检测FOXA1在非小细胞肺癌患者肺癌原发灶及转移灶肿瘤组织中表达情况： IHC结果显示，FOXA1主要表达于肿瘤细胞核，细胞质及胞膜无明显表达。我们发现在12例非小细胞肺癌原发灶及转移灶组织中FOXA1的表达水平有差异，在转移灶中高于原发灶，但P值未达到统计学意义。 在40例I期NSCLCI期和12例IV期患者肺癌组织中IV期肺癌患者中肺癌组织表达有较I期升高的趋势，P=0.176，未达到统计学意义。 在40例I期患者肺癌组织及40例IV期患者转移灶组织中，FOXA1在IV期病人转移灶组织中表达水平明显高于I期病人肺癌组织（P<0.001）。 【结论】 1.FOXA1mRNA在非小细胞肺癌细胞株及癌组织中普遍有所表达，可能是一个潜在致癌基因。 2.FOXA1与非小细胞肺癌转移有一定相关性。