以登革热为代表的蚊媒传病已经成为十分重要而且紧急的世界性公共卫生问题。据统计,全球每年约有一半的人有感染此类疾病的危险。伊蚊是传播登革热的主要媒介。登革热主要有四个血清型病毒,由于目前还没有有效的疫苗来预防感染,因此通过切断传播途径来防治登革热的传播至关重要。现今主要是通过物理方法和化学方法来消灭媒介蚊虫,但是对环境会造成不可逆的污染,对非目标物种也会造成一定程度的损伤,且逐步增加蚊虫的抗药性。因此,急需一种对环境友好,对生态可持续发展的有效生物策略来防控蚊媒疾病的传播。RNAi作为一种反向遗传工具,能够对目的基因进行敲除,以实现基因表达的负调控功能。HR3(孤儿核受体,Hormone receptor 3)在昆虫生殖发育过程中起着重要的作用,参与卵母细胞的成熟及雌性伊蚊产卵过程,同时调节蜕皮和昆虫蛹的形成,若敲除该基因,则将导致昆虫不能进行正常蜕皮,幼虫迅速死亡。羟基犬尿素(3-HK)是伊蚊体内高活性的中间体,容易氧化生成大量的活性氧,导致伊蚊死亡。3HKT(羟基犬尿氨酸转氨酶,3-hydroxykynurenine Transaminase)催化3-HK转化为黄尿烯酸,阻断该活性氧产生途径,有利于伊蚊正常生长发育。目的:编码HR3和3HKT两个蛋白的基因做为RNAi靶基因,在衣藻中表达后饲喂伊蚊幼虫,作用于伊蚊幼虫体内HR3和3HKT基因,降低其表达水平,从而确定工程藻株对伊蚊的致死作用,为生物灭蚊打下基础,达到生物防治登革热的目的。方法:对伊蚊的HR3和3HKT两个基因进行克隆,构建RNAi表达载体,将其转化进莱茵衣藻CC425藻株,喂食埃及伊蚊幼虫。对伊蚊幼虫进行生物学检测,细胞组织观察,RNA水平检验,确定转基因工程藻株灭蚊效果。结果:生物学观察,喂食HR3和3HKT转基因藻株的幼虫较对照组幼虫生长显著缓慢。饲喂转基因藻株的幼虫在第20小时就有死亡现象发生,并且喂食3HKT转基因藻株的幼虫较喂食HR3转基因藻株的幼虫死亡更为迅速。病理组织切片观察,喂食转基因衣藻的幼虫在表皮、中肠等部位均出现了不同程度的破坏。RNA水平检测,喂食转基因藻株的幼虫其靶基因表达水平均出现了不同程度的下降。结论:RNAi转基因藻株在伊蚊幼虫体内发生RNA干扰作用,降低HR3和3HKT的表达水平,最终阻碍伊蚊的生长发育进程,导致伊蚊幼虫的死亡。本研究为生物策略防控蚊媒传病提供了一定的技术途径和方法,为大规模防控蚊媒疾病贡献了新的思路。