MicroRNA-197过表达对食管癌细胞生物学特性的影响

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背景食管癌(Esophageal carcinoma,EC)在世界范围内都是一种常见的消化道恶性肿瘤,其发病率占恶性肿瘤的第8位,死亡率居世界范围内癌症死因的第6位。食管癌病人5年的存活率非常低,目前仅有10-40%。而在我国食管癌也是最常见的恶性肿瘤之一,死亡率非常高,居恶性肿瘤的第4位,发病率和死亡率仅次于胃癌、肺癌和肝癌。目前,临床上对食管癌的治疗主要方法是以外科手术治疗为主、联合药物化疗、术前辅助放化疗、同期放化疗相结合的方式,但总体疗效并不能达到预期效果,其中75%的患者都是在确诊后1年内死亡。因此,找到与食管癌发生发展相关的特异分子,具有重要意义。我们前期在相同TNM病理分期而预后不同的食管癌组织样本中运用高通量microRNA芯片杂交技术发现,microRNA-197(miR-197)在预后较差的组织样本中表达明显降低。本论文拟在分子水平研究mi R-197对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移生物学特性的影响,研究结果将有助于进一步阐明miR-197在食管癌细胞发生发展中扮演的角色,并为食管癌的分子分型、预后判断、分子靶向治疗以及临床治疗方案的选择等临床转化研究奠定理论和实验基础。目的研究miR-197异常表达对食管癌细胞株Eca109增殖、凋亡、迁移等生物学特性的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)法检测miR-197在食管癌细胞株Eca109中的表达情况。采用miRNA慢病毒过表达载体靶向改变miR-197在食管癌细胞株Eca109中的表达;利用噻唑蓝(MTT)法、细胞平板克隆形成实验、流式细胞术、Transwell小室实验等方法观察mi R-197异常表达对食管癌Eca109细胞增殖、凋亡和迁移等肿瘤细胞生物学特性的影响。结果(1)qPCR检测结果表明:mi R-197在食管癌细胞株Eca109的表达明显低于在正常食管上皮细胞HECC中的表达(P<0.01);(2)qPCR检测结果表明:在miR-197过表达慢病毒感染后的Eca109细胞中,miR-197的表达显著高于转染病毒空载体的细胞(P<0.01);(3)MTT检测和平板克隆形成实验结果表明:mi R-197过表达抑制食管癌细胞Eca109细胞的增殖(P<0.05);(4)流式细胞仪检测细胞凋亡率:miR-197过表达显著促进食管癌细胞株Eca109的凋亡(P<0.05);(5)细胞Transwell实验和划痕实验结果表明:与阴性对照组相比较,miR-197过表达能够明显抑制细胞迁移(P<0.05).结论miR-197过表达不仅能够抑制食管癌细胞株Eca109的增殖,而且促进Eca109细胞的凋亡,并且抑制食管癌细胞株Eca109的迁移。
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