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细胞传感器的发展丰富了环境污染检测的方法和手段,但是由于自身使用条件的限制,难以在实验室以外的空间完成检测。相对于游离状态,经过固定化处理后的细胞传感器具备了更多优势:细胞浓度提高,效率也随之上升;固定化材料对内部的细胞起到保护作用,屏蔽或减少了外界环境中的毒性物质等不利因素的压力与干扰;此外,固定化细胞更加适合于实际环境中的应用。但是固定化过程中,由于外界条件的变化,细胞传感器自身的生理活性也发生一定的变化,而检测效果也随之受到了影响。因此,有必要对细胞传感器固定化过程中相关的重要因素进行研究,并对其进行优化,以便获得最佳的检测效果。
首先固定化细胞传感器与游离状态下的检测结果进行了比较,可以得到更高的单位体积信号强度。固定化过程对细胞的存活数产生了影响,固定化时间越长,颗粒中细胞传感器浓度越低。而在检测过程中,固定化颗粒中的细胞传感器数量没有出现明显增长,而且远小于游离状态下细胞传感器的数量。
以各个检测时间下的荧光信号强度为指标,对于细胞与包埋剂之间的比例、固定化时间、以及固定化颗粒的投加量等因素通过正交试验进行研究。结果表明:在较短的检测时间内,细胞与包埋剂之间的比例对荧光信号的影响程度最高,其次是固定化时间,最后是固定化颗粒投加量。经过优化后的固定化及检测条件为:细胞与包埋剂之间的比例为20 mL(菌液)/10 mL(包埋剂);固定化为2h,颗粒投加量为1.25 mL(颗粒)/50 mL(培养基)。
对不同浓度的苯进行检测,结果表明:在较短的检测时间内,固定化过程对于高浓度苯的检测信号,具有更高的提升效果。
将苯系物细胞传感器与降解菌进行联合固定化。降解菌的加入对于细胞传感器的激发-发射光谱未产生明显影响。加入降解菌后的联合固定化颗粒,其检测信号随降解菌加入的比例变化而变化。在较短的检测时间内,加入的降解菌比例越高,荧光信号越低。但是加入一定比例的联合固定化颗粒,经过长时间诱导后,获得的荧光信号比不含有降解菌的固定化细胞传感器更高。
联合固定化颗粒进行在线降解与检测,结果与单独降解和检测的结果进行比较。联合固定化颗粒与只具有降解功能的固定化颗粒都具有良好的降解能力。但是进行在线检测的联合固定化颗粒,和单独的固定化细胞传感器相比,获得的检测信号要低。同时,进水流量对降解效果也产生影响:流量越低,水力停留时间越长,降解效果越好;但是对在线监测的影响规律并不明显。